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牡丹和芍药组织培养的研究

作　者: 李海刚
导　师: 孔祥生
学　校: 河南科技大学
专　业: 植物学
关键词: 牡丹芍药试管苗愈伤组织玻璃化褐化
分类号: S682.12
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本试验以牡丹和芍药为材料,主要研究了牡丹的胚培养、芽培养和影响试管苗玻璃化的因素,并且研究了芍药的休眠芽培养、愈伤组织的诱导和褐化的防止,结果如下:1.牡丹胚培养以‘凤丹’成熟胚为外植体,研究发现不同的培养基对牡丹胚萌发率有明显的影响,MS可以作为‘凤丹’胚培养的基本培养基,‘凤丹’胚在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+GA3 1.0 mg/L上的萌发率最高,MS+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0 mg/L是适合试管苗继代培养的培养基,试管苗在培养基1/2MS+IBA 2.0 mg/L上的生根率达到43.2%,牡丹种子经过45d的低温处理,胚萌发率有明显的提高。2.牡丹芽培养以牡丹休眠芽为材料,采用0.1% HgCl2 10min进行消毒既可减少污染又能减少试管苗的玻璃化。不同浓度的6-BA对不同牡丹品种休眠芽萌发率的影响不同。利用正交设计对‘洛阳红’试管苗增殖试验进行了研究,结果表明6-BA和KT是‘洛阳红’试管苗增殖过程中重要的生长调节物质,‘洛阳红’试管苗增殖的最优组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,增殖系数为2.15。不同品种在相同培养基上的增殖系数有明显差异。‘洛阳红’试管苗在培养基1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L中的生根状况较好,生根率可以达到82.5%,两步生根法可以提高试管苗的生根率。3.牡丹试管苗玻璃化的防止以MS为基本培养基,研究牡丹品种、琼脂、6-BA、大量元素和蔗糖浓度、光照等因素对试管苗玻璃化的影响表明,不同品种的牡丹试管苗在组织培养过程中出现不同程度的玻璃化,增加培养基中琼脂浓度、降低6-BA和大量元素的浓度、增加光照强度或采用自然光照均可以有效地降低牡丹试管苗玻璃化的发生。4.芍药休眠芽培养以芍药休眠芽为材料,2月份是芍药休眠芽采集的最佳时期。不同品种和不同培养基对芍药休眠芽萌芽率的影响有明显的不同,1/2MS比较适合作为诱导芍药休眠芽萌发的基本培养基。‘种生粉’试管苗增殖的最优组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,增殖系数为2.39。不同浓度的IBA对试管苗的生根率、根长和生根数都有一定的影响,芍药试管苗在培养基1/2MS+IBA 2.0 mg/L中的生根效果最好,生根率可以达到58.0%。5.芍药愈伤组织的诱导和愈伤组织褐化的防止以‘种生粉’为试验材料,比较不同外植体,不同基本培养基类型,不同激素组合对愈伤诱导率的影响表明,以试管苗叶柄为外植体,在MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6 g/L的培养基中诱导率最高可达80.0%;抑制褐化的研究表明,1/2WPM为最佳基本培养基,AgNO3的防止褐化效果最好;黑暗和低温都能不同程度的降低褐化的程度。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
第1章文献综述  10-18
  1.1 牡丹和芍药概述  10
  1.2 牡丹和芍药组织培养研究进展  10-15
    1.2.1 牡丹组织培养  10-14
    1.2.2 芍药组织培养  14-15
  1.3 牡丹和芍药组织培养过程中存在的问题  15-18
    1.3.1 褐化  15-16
    1.3.2 玻璃化  16
    1.3.3 污染  16
    1.3.4 生根困难和移栽成活率低  16-18
第2章材料与方法  18-25
  2.1 引言  18
  2.2 技术路线  18-19
  2.3 试验材料  19
  2.4 试验方法  19-25
    2.4.1 牡丹胚培养  19-20
    2.4.2 牡丹休眠芽培养  20-22
    2.4.3 牡丹试管苗玻璃化的防止  22
    2.4.4 芍药休眠芽培养  22-23
    2.4.5 芍药愈伤组织诱导和褐化防止  23-25
第3章结果与分析  25-45
  3.1 牡丹胚培养  25-28
    3.1.1 不同培养基对牡丹胚萌发率的影响  25
    3.1.2 不同激素组合对牡丹胚萌发率的影响  25-26
    3.1.3 不同预处理对牡丹胚萌发率的影响  26
    3.1.4 不同激素组合对试管苗继代培养的影响  26-27
    3.1.5 不同浓度IBA 对试管苗生根的影响  27-28
  3.2 牡丹休眠芽培养  28-32
    3.2.1 不同消毒方式对休眠芽培养的影响  28-29
    3.2.2 不同浓度6-BA 对牡丹品种休眠芽萌发率的影响  29-30
    3.2.3 不同品种对试管苗增殖的影响  30
    3.2.4 不同激素组合对试管苗增殖率的影响  30-31
    3.2.5 不同生根方式对试管苗生根的影响  31-32
  3.3 牡丹试管苗玻璃化的防止  32-36
    3.3.1 品种对牡丹试管苗玻璃化的影响  32-33
    3.3.2 琼脂浓度对牡丹试管苗玻璃化的影响  33
    3.3.3 不同浓度的6-BA 对牡丹试管苗玻璃化的影响  33-34
    3.3.4 大量元素浓度对牡丹试管苗玻璃化的影响  34-35
    3.3.5 蔗糖浓度对牡丹试管苗玻璃化影响  35
    3.3.6 光照强度对牡丹试管苗玻璃化的影响  35-36
  3.4 芍药休眠芽培养  36-39
    3.4.1 不同采集时间对芍药休眠芽萌芽率的影响  36-37
    3.4.2 不同培养基对芍药品种休眠芽萌芽率的影响  37
    3.4.3 不同激素组合对芍药试管苗增殖培养的影响  37-38
    3.4.4 不同浓度IBA 对芍药试管苗生根的影响  38-39
  3.5 芍药愈伤组织的诱导  39-41
    3.5.1 不同培养基对芍药愈伤组织诱导的影响  39
    3.5.2 不同外植体对芍药愈伤组织诱导的影响  39-40
    3.5.3 不同激素组合对芍药愈伤组织诱导的影响  40-41
  3.6 芍药愈伤组织褐化的防止  41-45
    3.6.1 不同基本培养基对芍药愈伤组织褐化的影响  41
    3.6.2 不同外植体对芍药愈伤组织褐化的影响  41-42
    3.6.3 不同激素组合对芍药愈伤组织褐化的影响  42-43
    3.6.4 不同种类的抗褐化剂对芍药愈伤组织褐化的影响  43-44
    3.6.5 不同培养条件对芍药愈伤组织褐化的影响  44-45
第4章结论与讨论  45-51
  4.1 结论  45-47
  4.2 讨论  47-51
    4.2.1 牡丹芽培养  47
    4.2.2 牡丹芽培养  47-48
    4.2.3 牡丹试管苗玻璃化的防止  48-49
    4.2.4 芍药休眠芽培养  49
    4.2.5 芍药愈伤组织诱导和褐化防止  49-51
参考文献  51-56
缩略语词汇表  56-57
附录  57-60
致谢  60-61
攻读硕士学位期间的研究成果  61

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