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茶藨生柱锈重寄生菌（Pestalotiopsis sp.）的生物学特性及毒素研究

作　者: 黄丽丹
导　师: 陈玉惠
学　校: 西南林学院
专　业: 森林保护学
关键词: 重寄生菌 生物学特性 毒素 作用机理 防治效果
分类号: S769
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


华山松疱锈病(Armandii pine blister rust)是由茶藨生柱锈菌(Cronartium ribicola J.C.Fischer)引起的一种毁灭性松干锈病,主要危害华山松中幼林,导致受害华山松高生长、径围生长和材积量明显下降,当病部溃疡斑环绕树干周长一半以上时造成枝干枯萎,最终整株死亡。化学防治在华山松疱锈病中一直占据主导地位,此方法虽然在一定时间和一定程度上能取得较好的防治效果,但往往由于操作困难、难以持久及环境污染等问题使得大部分病区的华山松疱锈病仍未得到有效控制且有继续蔓延扩张的趋势,严重威胁着长江上游防护林体系建立,给生态恢复带来极大困难。重寄生菌是一类对植物病原菌有控制作用的重要微生物资源,广泛用于植物病害生物防治的生防菌多数是植物病原菌的重寄生菌。《洱源枝顶孢侵染华山松疱锈菌机理研究》项目组成员在过去的研究中筛选出一株华山松疱锈病病原茶藨生柱锈的重寄生菌——MM011菌株,该菌对锈孢子具有很强的伤害作用,且以毒素伤害为其作用机理。开展该重寄生菌生物学特性及毒素的研究对开发新型生防制剂防治华山松疱锈病有重要的理论和实践意义。本研究对重寄生菌MM011的生物学特性、产毒条件、毒素的提取和基本性质及活性成分的分离纯化进行了较系统的初步分析和研究,并对MM011活菌体及毒素原液对华山松幼苗的安全性和对华山松疱锈病感病枝干的室内、室外防治效果进行了评价。主要研究结果如下:(1)营养物质对MM011菌丝生长的影响:不同碳源对菌丝生长存在显著差异,多糖比单糖或二糖更有利于MM011生长,可溶性淀粉、玉米粉对菌丝生长最为有利,而对乳糖利用最差。MM011能有效利用有机氮中的蛋白胨、酵母浸膏、黄豆粉和各类氨基酸(谷氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸),但对无机氮中的铵态和硝酸态氮利用较差。无机盐离子明显影响MM011菌丝生长,以磷酸二氢钾、磷酸二氢钠最好,其中又以磷酸二氢钠最佳,并极显著高于其它几种无机盐处理。不同生长因子对MM011菌丝生长存在一定的差异,但促进作用不明显,仅复合VB处理后,菌落直径较对照组大,而其余各种维生素对菌丝生长促进作用不大。(2)环境因子对MM011菌丝生长的影响:MM011对温度的适应范围较广, 5~35℃下均能生长,但以20~30℃生长较好。低温(<15℃)或高温(>35℃)菌丝生长都会受到抑制。光照与MM011菌丝生长关系不密切,不同光照条件下菌丝生长速度差别不大。MM011在pH2～9范围内都能够生长,但以pH为4～7的微酸性环境内生长较好,过碱(pH大于7)或过酸(pH小于4)对菌丝的生长都不利。在-0.23～-6.487MPa水势下,菌丝均能生长,低于-8.0MPa,菌丝完全不能生长。MM011是一种好气性真菌,摇床速度达到150r/min最有利于该菌生长;接种量对菌丝最大产量影响不大,

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-12
1 前言  12-27
  1.1 植物锈菌重寄生菌研究概况  13-16
    1.1.1 国外研究进展  13-14
    1.1.2 国内研究进展  14-16
  1.2 林木病原真菌毒素及病原重寄生真菌毒素研究进展  16-21
    1.2.1 林木病原真菌及病原重寄生真菌毒素的化学类型  16-17
    1.2.2 林木病原真菌及病原重寄生真菌毒素作用机理  17-19
    1.2.3 毒素合成的调控机制  19
    1.2.4 林木病原真菌及病原重寄生真菌毒素的应用  19-21
  1.3 拟盘多毛孢的研究进展  21-25
    1.3.1 拟盘多毛孢的生物学特性研究  22-23
    1.3.2 拟盘多毛孢代谢产物的研究  23-25
  1.4 本课题研究的目的和意义  25-26
  1.5 实验的技术路线  26-27
2 重寄生菌MM011 的形态特征及生物学特性研究  27-47
  2.1 材料与方法  27-30
    2.1.1 重寄生菌MM011 的分离  27
    2.1.2 重寄生菌MM011 的培养性状  27
    2.1.3 重寄生菌MM011 的生物学特性  27-30
  2.2 结果与分析  30-44
    2.2.1 MM011 的形态特征及鉴定  31
    2.2.2 重寄生菌MM011 的生物学特性  31-44
  2.3 结论与讨论  44-47
3 重寄生菌MM011 产毒培养条件筛选及粗毒素基本性质研究  47-60
  3.1 MM011 菌株的复壮及产毒培养条件的筛选  47-52
    3.1.1 材料和方法  47-49
    3.1.2 结果与分析  49-52
  3.2 MM011 毒素物质的提取及基本性质研究  52-58
    3.2.1 材料和方法  53-54
    3.2.2 结果与分析  54-58
  3.3 结论与讨论  58-60
    3.3.1 MM011 产毒条件的优化  58-59
    3.3.2 MM011 毒素的基本性质研究  59-60
4 MM011 毒素组分的分离与纯化  60-67
  4.1 材料与方法  60-62
    4.1.1 培养方法  60
    4.1.2 粗毒素样品的制备  60
    4.1.3 试剂  60-61
    4.1.4 主要仪器设备  61
    4.1.5 毒素的分离纯化  61-62
  4.2 结果与分析  62-65
    4.2.1 展开剂的选择  62-63
    4.2.2 柱层析分离  63-64
    4.2.3 柱层析生测结果  64
    4.2.4 毒素的紫外吸收特性研究  64-65
  4.3 结论与讨论  65-67
5 MM011 活菌体及其毒素原液的应用研究  67-79
  5.1 MM011 活菌体及其毒素原液对华山松幼苗的安全性检测  67-69
    5.1.1 材料与方法  67
    5.1.2 结果与分析  67-69
  5.2 MM011 不同接种体对华山松疱锈病的室内控制效果  69-74
    5.2.1 材料与方法  69-70
    5.2.2 结果与分析  70-74
  5.3 MM011 活菌体及其毒素原液对华山松疱锈病的野外控制效果  74-77
    5.3.1 材料与方法  74-75
    5.3.2 结果与分析  75-77
  5.4 结论与讨论  77-79
    5.4.1 安全性试验  77
    5.4.2 室内防治试验  77
    5.4.3 室外防治试验  77-79
6 问题与展望  79-81
  6.1 存在问题  79-80
    6.1.1 关于毒素的生物测定  79
    6.1.2 关于毒素的提取与纯化  79
    6.1.3 关于活体菌的应用  79-80
  6.2 展望  80-81
参考文献  81-92
致谢  92-93
附录  93-96

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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林保护学 > 其他防治方法
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