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缺氧诱导因子-1α基因沉默食管鳞癌细胞株的构建及HIF-1α基因在食管鳞癌细胞中功能的初步研究

作　者: 肖斌
导　师: 施瑞华；于莲珍
学　校: 南京医科大学
专　业: 消化内科
关键词: 食管鳞癌 RNA干扰短发夹状RNA 绿色荧光蛋白缺氧诱导因子-1α 稳定转染血管内皮生长因子血红素加氧酶基质金属蛋白酶-2 PTEN(与张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸基因)
分类号: R735.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的：食管鳞癌是消化系统肿瘤中恶性程度较高的常见肿瘤之一，通常治疗困难，预后不佳。目前对其发病、进展机制尚未完全明了，进一步了解食管鳞癌的发生、发展机制，提高早期诊断率、寻找有效的治疗途径和准确进行预后评估仍是当务之急。为此设计并开展本课题，通过RNA干扰手段构建缺氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1 alpha，HIF-1α)基因沉默细胞株并初步研究HIF-1α基因在食管鳞癌细胞中的功能，为今后深入研究食管鳞癌发病机制、开展基因治疗打下基础。方法： 1．通过在食管鳞癌细胞系Eca-109中对绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein，GFP)报告基因的RNA干扰实验，了解食管鳞癌细胞Eca-109是否存在RNA干扰效应，摸索优化干扰实验条件以行后续研究。 2．构建针对HIF-1α mRNA的shRNA真核表达载体，测序鉴定后瞬时转染人食管鳞癌细胞Eca-109和胚肾细胞293T，以RNA干扰手段抑制HIF-1α的表达，经实时荧光定量RT-PCR和Western blot分别在

全文目录

一、英文缩略词表  4-5
二、中文摘要  5-9
三、英文摘要  9-15
四、引言  15-18
五、第一部分食管鳞癌细胞系 Eca-109RNA干扰效应的研究  18-38
  中文摘要  18-19
  英文摘要  19-20
  引言  20-21
  材料与方法  21-28
  结果  28-30
  讨论  30-38
六、第二部分 Eca-109细胞中特异性抑制缺氧诱导因子-1α RNA干扰体系的建立  38-59
  中文摘要  38-39
  英文摘要  39-40
  引言  40-41
  材料与方法  41-46
  结果  46-50
  讨论  50-59
七、第三部分缺氧诱导因子-1α基因沉默食管鳞癌细胞株的构建  59-70
  摘要  59-60
  引言  60
  材料与方法  60-62
  结果  62-63
  讨论  63-70
八、第四部分缺氧诱导因子-1α基因在食管鳞癌细胞中功能初步研究  70-91
  摘要  70-71
  引言  71-72
  材料与方法  72-75
  结果  75-76
  讨论  76-91
九、参考文献  91-100
十、综述  100-112
十一、致谢  112-114
十二、论文独创性声明及使用授权声明  114

缺氧诱导因子-1α基因沉默食管鳞癌细胞株的构建及HIF-1α基因在食管鳞癌细胞中功能的初步研究

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