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疏肝软坚汤治疗肝纤维化的实验研究

作　者: 高丽红
导　师: 刘学文
学　校: 辽宁中医学院
专　业: 方剂学
关键词: 肝纤维化透明质酸层粘连蛋白 Ⅲ型前胶原 Ⅲ型胶原转化生长因子β1 结蛋白 m型胶原mRNA
分类号: R289.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
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内容摘要

目的：本实验从组织形态学、免疫组织化学、分子生物学指标方面，观察疏肝软坚汤对免疫损伤性肝纤维化大鼠的影响，旨在探讨疏肝软坚汤治疗肝纤维化的作用机理。方法：用猪血清制备肝纤维化模型；疏肝软坚汤作治疗组；秋水仙碱作对照组；并设空白对照组。除空白对照组外，其余三组45只大鼠采用未灭活猪血清每周二次腹腔注射，连续5周后，改每周1次腹腔注射，10周后结束。造模第5周后，给药治疗，连续35天，每天一次。在实验的第8、9、10周每组随机各取一只处死，光镜下观察肝脏，证明造模成功。实验第10周，腹主动脉取血，用放免法检测血清中透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、三型前胶原（PCⅢ），同时取肝脏组织，免疫组化检查Ⅲ型胶原（CollagenⅢ）、转化生长因子β₁（TGFβ₁）、结蛋白（Dm）的阳性细胞以及原位杂交检查Ⅲ型胶原mRNA的表达，光镜下观察肝组织病理变化。结果：模型组肝脏内有明显的纤维组织增生，假小叶形成；疏肝软坚汤治疗组肝脏结构基本正常，未见纤维组织增生，无假小叶形成；疏肝软坚汤治疗组和空白对照组、秋水仙碱组HA、LN、PCⅢ水平均明显低于模型组，而且疏肝软坚汤治疗组又显著低于秋水仙碱组（P＜0.05）；TGFβ₁的免疫组化显示模型组明显增多，疏肝软坚汤治疗组、秋水仙碱组比模型组明显减少；Dm的免疫组化显示模型组Dm阳性细胞明显增多，疏肝软坚汤治疗组、秋水仙碱组Dm阳性细胞较少；CollagenⅢ的免疫组化显示模型组明显增多，疏肝软坚汤治疗组、秋水仙碱组则较少；CollagenⅢ mRNA的原位杂交显示模型组表达增强，疏肝软坚汤治疗组、秋水仙碱组表达较弱。结论：疏肝软坚汤有明显的抗肝纤维化作用，效果明显优于秋水仙碱组。推测其作用机理可能在于疏肝软坚汤能保护肝细胞、抑制肝星状细胞（HSC）的活化及TGFβ₁、CollagenⅢmRNA的表达，降低胶原的合成。

疏肝软坚汤治疗肝纤维化的实验研究

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