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血管紧张素Ⅱ-1型受体shRNA对自发性高血压大鼠血压作用的实验研究

作　者: 张金莲
导　师: 肖传实；邱龄
学　校: 山西医科大学
专　业: 心血管内科学
关键词: RNAi 高血压 血管紧张素Ⅱ—1型受体 自发性高血压大鼠 心室重构
分类号: R544.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


一、血管紧张素Ⅱ—1型受体shRNA对自发性高血压大鼠血压及组织AT1R基因表达的影响目的:观察以重组腺病毒为载体的血管紧张素Ⅱ—1型受体的shRNA(Ad5-AT1R-shRNA)对自发性高血压大鼠血压的作用及对组织AT1R基因表达的影响。方法:在293细胞内扩增已构建好的荧光蛋白标记的携带AT1R shRNA的重组腺病毒(Ad5-AT1R-shRNA),TCID50法测定重组腺病毒滴度。22只自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)随机分为2组,实验组(n=11)和高血压对照组(n=11),另设11只Wistar-Kyoto大鼠(WKY)为正常血压对照组,实验组SHR经鼠尾静脉单次注射Ad5-AT1R-shRNA,Ad5-AT1R-shRNA经TCID50法测定感染性滴度为1.7×109 TCID50/ml,高血压对照组和正常血压对照组经鼠尾静脉单次注射对照重组复制缺陷型腺病毒(Ad5-EGFP),感染性滴度为7.9×109 TCID50/ml。注射前及注射后每天定时监测血压及心率,于血压出现明显下降时处死部分动物,取出心脏、肝脏、肾脏、主动脉及肾上腺组织,在荧光显微镜下观察心脏、肝脏、肾脏、主动脉及肾上腺组织对Ad5-AT1R-shRNA的吸收情况,采用荧光定量PCR检测肝脏、肾脏及主动脉组织AT1R mRNA的表达情况。结果:实验开始24小时后,给予Ad5-AT1R-shRNA的实验组SHR收缩压出现明显下降,最大降压幅度可达28.902mmHg,与SHR组比较有显著性差异(P<0.05),此后降压作用可持续5天,最长可持续7天;注射Ad5-EGFP后的SHR组和WKY组血压均未见明显下降,SHR组血压有的可见继续升高;三组动物的心率变化不明显;肾脏、心脏、肝脏、主动脉、及肾上腺组织在荧光显微镜下可见大量荧光表达;实验组SHR肾脏及主动脉AT1R的mRNA表达量明显低于SHR组(P<0.01);结论: Ad5-AT1R-shRNA经静脉注射后可被许多重要脏器吸收,且对SHR的AT1R起到RNA干扰的作用,在mRNA水平抑制AT1R的基因表达;Ad5-AT1R-shRNA通过阻抑AT1R生成对SHR可起到明显且持久的降压作用。二、血管紧张素Ⅱ—1型受体shRNA对自发性高血压大鼠左心室重构的影响目的:观察通过重复注射以重组腺病毒为载体的血管紧张素Ⅱ—1型受体的shRNA对自发性高血压大鼠血压及心室重构的影响。方法:12只SHR随机分为2组,实验组和高血压对照组,另设6只WKY为正常血压对照组,实验组经鼠尾静脉注射已构建好的Ad5-AT1R-shRNA,感染性滴度为1.7×109 TCID50/ml,高血压对照组和正常血压对照组注射对照重组腺病毒(Ad5-EGFP),感染性滴度为7.9×109 TCID50/ml,分别共注射两次,于注射前及注射后定时测量大鼠尾动脉收缩压

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
正文  9-30
  前言  9-10
  第一部分 血管紧张素Ⅱ—1 型受体shRNA对自发性高血压大鼠血压及组织AT1R基因表达的影响  10-16
    材料与方法  10-12
    结果  12-14
    讨论  14-16
  第二部分 血管紧张素Ⅱ—1型受体shRNA对自发性高血压大鼠左心室重构的影响  16-20
    材料与方法  16-17
    结果  17-19
    讨论  19-20
  结论  20-21
  参考文献  21-23
  附图  23-30
综述  30-37
  正文  30-35
  参考文献  35-37
个人简介  37-38
致谢  38

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管（循环系）疾病 > 血压异常 > 高血压
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