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用RAPD和SSR分子标记鉴定小金海棠F_1代杂种实生苗研究

作　者: 唐建民
导　师: 周志钦
学　校: 西南大学
专　业: 果树学
关键词: 小金海棠 山荆子 F1杂种 RAPD SSR 形态学 鉴定
分类号: S661.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


小金海棠（Malus xiaojinensis Cheng et Jiang）具有多种抗逆特性，是全球范围内筛选出的第一个抗缺铁黄叶病的苹果基因型，对苹果潜隐病毒也有较强的抗性，是苹果属（Malus Miller）植物中一种极珍贵的野生种质资源。山荆子（Malus baccata Borkh．）是中国苹果生产中最重要的砧木资源之一，但也是苹果属植物中极易发生缺铁黄叶病的种类。利用上述两种资源的优良基因开展苹果砧木育种，对中国的苹果生产以及苹果属植物种质资源的研究与持续利用都具有重要的理论和实践价值。由于小金海棠具有无融合生殖特性，早期准确、快速、有效地鉴定其F1代杂种实生苗对于以杂交育种手段研究利用其众多抗逆基因具有重要意义。RAPD技术是现有鉴定果树杂种实生苗最为简单、快速和有效的分子标记技术，但RAPD技术本身存在一定的不稳定性。为了建立用现代分子标记鉴定苹果杂种实生苗的方法，在本论文中我们对小金海棠和山荆子F1代杂交实生苗79个单株进行了RAPD分析，并用SSR标记对RAPD标记的初步鉴定结果进行了进一步的验证。同时，我们对用分子标记鉴定出的杂种实生苗的叶片形态进行了观察分析。研究结果表明。（1）RAPD标记初步鉴定出的杂种实生苗有72.2％得到SSR标记的证实。（2）“叠加”、“新带”和RAPD标记特异位点数是利用RAPD标记鉴定小金海棠F1代杂种实生苗的可靠信息。（3）利用“叠加”和“新带”两种RAPD带型时，只要RAPD标记特异位点数≥12时三者结合运用就可以为小金海棠F1代杂种实生苗提供可靠的鉴定依据。（4）利用叶片形态特征难于对小金海棠与山荆子的杂种实生苗进行早期的准确鉴定。（5）本研究共获得经过RAPD和SSR分子标记证实的13株的杂种实生苗。这些杂种新材料既是苹果砧木育种的原始材料，也可以通过进一步鉴定成为栽培苹果的优良砧木。我们的研究为开发利用我国珍贵的苹果资源小金海棠以及利用分子标记技术早期快速鉴定苹果杂种实生苗提供了有用的信息和新的依据。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
第一章 文献综述  10-24
  1.1 小金海棠研究进展  10-13
    1.1.1 生态特点  10-11
    1.1.2 植物学特征与生物学特性  11
    1.1.3 铁的吸收与利用  11
    1.1.4 小金海棠抗逆性研究  11-12
    1.1.5 小金海棠园艺学特性  12-13
    1.1.6 小金海棠遗传多样性研究  13
  1.2 山荆子研究进展  13-14
    1.2.1 生态特点  13
    1.2.2 植物学特征与生物学特性  13
    1.2.3 山荆子抗逆性研究  13-14
    1.2.4 铁的吸收与利用  14
    1.2.5 山荆子的营养价值  14
  1.3 遗传标记与果树杂种鉴定  14-17
    1.3.1 形态学特征  15-16
    1.3.2 细胞学标记  16
    1.3.3 生化标记  16-17
  1.4 DNA分子标记  17-24
    1.4.1 DNA分子标记的种类  18-21
    1.4.2 DNA分子标记在苹果资源与遗传育种研究中的应用  21-24
第二章 引言  24-26
  2.1 论文研究的目的及意义  24-25
  2.2 论文的主要研究思路  25-26
第三章 材料与方法  26-31
  3.1 材料  26
  3.2 方法  26-31
    3.2.1 形态性状观察与分析  26
    3.2.2 总DNA的提取  26-27
    3.2.3 RAPD分析  27-28
    3.2.4 SSR分析  28-31
第四章 结果与分析  31-37
  4.1 形态学研究结果  31-34
    4.1.1 田间性状观察结果  31-32
    4.1.2 杂种实生苗的形态特征  32-34
  4.2 分子生物学研究结果  34-37
    4.2.1 RAPD标记及其在亲本和杂交实生苗中的多样性  34
    4.2.2 SSR标记  34-37
第五章 讨论  37-39
  5.1 RAPD的不稳定性与生物材料的遗传背景有关  37
  5.2 RAPD标记中异于亲本的“新带”  37-38
  5.3 SSR无效基因现象  38
  5.4 具有高无融合生殖特性材料的杂交效率  38-39
第六章 结论  39-40
  6.1 获得13株杂种实生苗  39
  6.2 RAPD标记鉴定杂种的可靠性带型  39
  6.3 “叠加”、“新带”和RAPD标记特异位点数  39-40
参考文献  40-46
附录一  46-47
附录二  47-49
致谢  49-50
发表论文和参加的研究课题  50-51
附发表论文  51

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 仁果类 > 苹果
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