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PTA1/CD226转基因小鼠胸腺细胞的发育研究
作 者: 方亮
导 师: 金伯泉;缪军
学 校: 第四军医大学
专 业: 免疫学
关键词: 胸腺细胞 小鼠PTA1 转基因小鼠 四环素调控表达系统
分类号: R392
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 22次
引 用: 0次
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内容摘要
目的:建立四环素调控的mPTA1/CD226转基因小鼠,对转基因小鼠胸腺细胞的发育进行研究。 方法:①使用pcDNA3-mPTA1和pBI-5载体构建用于四环素调控转基因小鼠制备的pBI-5-mPTA1载体。②采用显微注射的方法将pBI-5-mPTA1载体片段导入B6D1F1小鼠受精卵,对新生小鼠耳成纤维细胞进行体外培养,用含rtTA的pUHD17.1质粒转染细胞,选出荧光素酶表达活性依赖Dox的小鼠。③将阳性小鼠与正常C57BL/6小鼠交配,分别使用mPTA1和荧光素酶(luciferase)引物对子代小鼠的基因组DNA进行PCR检测和鉴定,选取双阳性的Ptet-mPTA1转基因小鼠的F1代,将其继续与C57BL/6小鼠交配,不断得到子代小鼠,直至F4代以后。④将阳性的Ptet-mPTA1转基因小鼠与携带有tTA的EμSR-tTA转基因小鼠杂交,得到子代小鼠,同时使用mPTA1和tTA引物对其基因组DNA进行PCR检测,选取mPTA1和tTA双阳性的小鼠。⑤使用荧光素酶检测试剂盒对杂交的阳性小鼠的不同组织,如胸腺、脾脏、心脏、肾脏等进行
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全文目录
缩略语表 5-7 中文摘要 7-10 英文摘要 10-13 前言 13-15 文献回顾 15-29 正文 29-56 1 四环素调控的PTA1/CD226转基因小鼠的构建 29-37 2 Ptet-mPTA1/EμSR-tTA双转基因小鼠的建立及表型分析 37-47 3 PTA1/CD226转基因小鼠胸腺细胞的发育研究 47-56 小结 56-57 参考文献 57-64 个人简历和研究成果 64-65 致谢 65
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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