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化学合成2\'-氧-甲基鸟嘌呤核苷（P6）诱导Hela细胞凋亡的作用及其机制的研究

作　者: 黄懿
导　师: 王金龙
学　校: 天津医科大学
专　业: 免疫学
关键词: P6(2’-O-methylguanosine,2’-氧-甲基鸟嘌呤核苷) 凋亡诱导核苷(apoptosis-inducing nucleosides,AINs) 肿瘤(tumor) 凋亡(apoptosis) Hela细胞 淋巴细胞(lymphocyte) 增殖(proliferation) 半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3) Bax Bcl-2(B-Cell lymphoma/leukemia 2,B细胞淋巴瘤/白血病基因2)
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 51次
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内容摘要


【目的】观察化学合成的P6的抗肿瘤作用,同时观察P6对正常细胞淋巴的作用,以反映其是否有副作用。并初步探讨了P6抗肿瘤作用的可能机制。【方法】 1.细胞培养 在本实验中,Hela细胞混悬于含2%FBS的RPMI 1640培养液,小鼠淋巴细胞混悬于含15%FBS的RPMI 1640培养液,于37℃ 5%CO2条件下培养。两种细胞均分为四组,于培养开始时分别给予0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL及150μg/mL的P6。Hela细胞培养168小时,小鼠淋巴细胞培养72小时。 2.淋巴细胞的活化 淋巴细胞取自小鼠脾脏,并经ConA（2.5μg/mL）活化,加入不同浓度的P6（0～150μg/mL）后,培养72小时。 3.形态学观察和MTT实验 Hela细胞及小鼠淋巴细胞在培养时给予P6（0-150μg/mL）。以形态学观察的方法观察细胞的形态改变,以MTT的方法检测细胞的增殖状况。 4.DNA ladder检测 提取经P6（0～150μg/mL）处理的Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的DNA进行琼脂糖凝胶电泳,检测DNA片段的形成。 5.RT-PCR技术 提取经P6（0～150μg/mL）处理的Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的总mRNA,用RT-PCR的方法分析Bax基因及Bcl-2基因的转录水平。 6.流式细胞术 Hela细胞及小鼠淋巴细胞在培养时给予P6（0～150μg/mL）。在培养结束时,用PI对Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的DNA染色,用流式细胞

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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