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以5α-还原酶为靶点研究肉豆蔻改善良性前列腺增生的作用

作　者: 况刚
导　师: 邹文俊
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 肉豆蔻 5α-还原酶活性良性前列腺增生
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

前期应用表达5α-还原酶Ⅱ基因的CHO细胞筛选时发现,中药肉豆蔻乙醇提取物能显著抑制基因克隆来源的5α-还原酶活性,阻断睾酮(T)向二氢睾酮(DHT)的转换。为了证实体外筛选结果和深入评价肉豆蔻的的作用,本论文进行了如下研究:(1)从大鼠前列腺组织中提取5α-还原酶,建立一种5α-还原酶活性测定方法,以此研究肉豆蔻乙醇提取物对来源于前列腺组织中5α-还原酶的抑制作用;(2)在已建立的体外5α-还原酶活性测定基础上,研究肉豆蔻不同提取物(系统溶剂法从肉豆蔻乙醇提取物中萃取)对组织来源5α-还原酶的抑制作用;(3)采用丙酸睾酮致前列腺增生大鼠模型,以前列腺组织中DHT含量的改变作为主要指标并结合传统的前列腺重量或指数等指标的变化,评价肉豆蔻乙醇提取物对前列腺增生大鼠的治疗作用。结果表明:(1)通过各种酶反应条件的优化,建立了一种稳定的大鼠前列腺组织来源的5α-还原酶活性测定方法,肉豆蔻乙醇提取物能显著抑制这种组织来源的5α-还原酶活性,阻断睾酮的转换,使DHT的体外合成减少,由此证实了前期在CHO细胞中筛选的结果,即肉豆蔻具有5α-还原酶抑制剂的作用;(2)不同溶剂提取物也显著抑制大鼠前列腺组织来源的5α-还原酶活性,以乙醚提取物的抑制效率最强,为进一步分离或研究肉豆蔻的有效部位或有效活性成分奠定了基础;(3)丙酸睾酮可使去势大鼠前列腺组织内的DHT水平明显升高,而肉豆蔻乙醇提取物在720mg/kg与

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
引言  8-10
文献研究  10-20
  1 现代医学对以5α-还原酶为靶点治疗良性前列腺增生的相关认识  10-16
    1.1 良性前列腺增生及其发病机理  10-12
    1.2 5α-还原酶研究概况  12-13
    1.3 治疗良性前列腺增生的5α-还原酶抑制剂  13-16
  2 中医药对良性前列腺增生的认识及相关实验研究  16-19
    2.1 中医药对良性前列腺增生的认识  16-17
    2.2 单味及复方中药以5α-还原酶为靶点改善良性前列腺增生的实验研究  17-19
  3 中药肉豆蔻能显著抑制5α-还原酶活性，值得进一步研究  19-20
实验研究  20-34
  1 体外实验  20-29
    1.1 实验材料、动物与仪器  20-22
    1.2 实验方法与结果  22-29
      1.2.1 5α-还原酶活性测定方法及5α-还原酶抑制剂体外筛选模型的建立  22-28
        1.2.1.1 大鼠5α-还原酶的制备  22
        1.2.1.2 5α-还原酶活性测定及反应条件的优化  22-28
          1.2.1.2.1 5α-还原酶抑制剂体外筛选模型反应体系的确立  23
          1.2.1.2.2 睾酮浓度对酶活性的影响  23-24
          1.2.1.2.3 NADPH浓度对酶活性的影响  24-25
          1.2.1.2.4 酶提取物浓度对酶活性的影响  25-26
          1.2.1.2.5 温度及时间对酶活性的影响  26-27
          1.2.1.2.6 非那雄胺对酶活性的抑制  27-28
      1.2.2 肉豆蔻提取物对5α-还原酶的抑制作用  28-29
        1.2.2.1 肉豆蔻提取物的制备  28
        1.2.2.2 肉豆蔻各提取物对大鼠前列腺组织中5α-还原酶的影响  28-29
  2 体内实验  29-34
    2.1 实验材料、动物与仪器  29-30
    2.2 统计学方法  30
    2.3 实验方法与结果  30-34
      2.3.1 肉豆蔻乙醇提取物对正常大鼠前列腺的影响  30-32
      2.3.2 肉豆蔻乙醇提取物对丙酸睾酮诱发的去势大鼠前列腺增生的影响  32-34
讨论  34-45
  1 关于实验设计的思路  34-41
    1.1 5α-还原酶活性测定方法的建立  34-36
    1.2 体外实验中以非那雄胺作阳性对照的可行性及存在的问题  36-37
    1.3 良性前列腺增生动物模型的选择  37-38
    1.4 体内实验中阳性药物的选择  38-39
    1.5 体内实验中检测指标的选择  39-41
  2 非那雄胺对注射丙酸睾酮的去势大鼠良性前列腺增生的影响  41-42
  3 中药肉豆蔻乙醇提取物改善大鼠良性前列腺增生的作用及机理的确认  42-44
    3.1 抑制5α-还原酶活性是肉豆蔻乙醇提取物改善大鼠良性前列腺增生作用的重要机制  43
    3.2 肉豆蔻乙醇提取物可能对5α-还原酶Ⅱ具有选择性抑制作用  43-44
  4 相关问题探讨—前列腺组织内睾酮水平的变化可能与芳香化酶活性有关  44-45
结论  45-46
前景与展望  46-47
致谢  47-48
参考文献  48-57
附录Ⅰ 公开发表的学术论文、专著及科研成果  57-58
附录Ⅱ 声明  58

以5α-还原酶为靶点研究肉豆蔻改善良性前列腺增生的作用

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