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小檗碱对小鼠淋巴细胞的药理作用及其机制的研究

作　者: 杜丽蕊
导　师: 何贤辉
学　校: 暨南大学
专　业: 医学免疫学
关键词: 小檗碱淋巴细胞细胞周期细胞凋亡淋巴细胞亚群免疫抑制作用细胞黏附迟发型超敏反应蛋白激酶Cθ 绿色荧光蛋白融合蛋白细胞转染
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

目的: 通过分析小檗碱(berberine,Ber)对小鼠淋巴细胞及其亚群的增殖和细胞周期的影响,以及对二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)的药理效应,从细胞和分子水平探讨Ber免疫抑制作用的机制。方法: 1.分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白(concanavalin,Con A)或者二丁酸佛波酯(phorbol 12,13-dibutyrate,PDB)和离子霉素(ionomycin,Ion)进行刺激。以WST-1检测淋巴细胞的增殖情况;用碘化丙锭(propidium iodide,PI)染色分析细胞周期分布;细胞凋亡以Annexin-Ⅴ染色进行分析。 2.分离小鼠淋巴结细胞,以羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)染色,加入多克隆刺激剂或者PDB和Ion进行刺激,以PE-anti-mouse CD3、Cy-Chrome-anti-mouse CD4染色,以流式细胞仪分析Ber对T淋巴细胞以及CD4~+T淋巴细胞体外增殖的影响。 3.采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发

全文目录

中文摘要  7-10
英文摘要  10-14
前言  14-28
  1.小檗碱对免疫系统作用的研究回顾及现状  14-17
    1.1 对迟发型超敏反应和炎症反应的影响  14-15
    1.2 对炎症因子的作用  15-16
    1.3 对T细胞的活化与增殖影响  16
    1.4 对T细胞分化的影响  16
    1.5 对移植的影响  16
    1.6 对自身免疫性疾病的抑制作用  16-17
  2.PKCθ在T细胞活化信号转导中的核心作用  17-19
  3.CD4~+T细胞及其功能  19-21
  4.迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity，DTH)的机制  21
  5.T细胞体外增殖的评价指标  21-22
  6.本课题的研究目的和意义  22-24
  参考文献  24-28
第一部分：小檗碱对淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响  28-47
  1.1 材料  28-30
  1.2 方法  30-32
  1.3 结果  32-42
  1.4 讨论  42-45
  参考文献  45-47
第二部分：小檗碱对T淋巴细胞及其亚群体外增殖的影响  47-56
  2.1 材料  47-48
  2.2 方法  48-49
  2.3 结果  49-54
  2.4 讨论  54-55
  参考文献  55-56
第三部分：小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响  56-67
  3.1 材料  56-57
  3.2 方法  57-59
  3.3 结果  59-65
  3.4 讨论  65-66
  参考文献  66-67
第四部分：小檗碱对PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响  67-77
  4.1 材料  67-68
  4.2 方法  68-69
  4.3 结果  69-74
  4.4 讨论  74-76
  参考文献  76-77
总结  77-78
附录  78-79
致谢  79

小檗碱对小鼠淋巴细胞的药理作用及其机制的研究

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