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中医活血化瘀法影响骨折愈合的基础研究

作　者: 崔宪春
导　师: 谢进
学　校: 山东中医药大学
专　业: 中医骨伤科学
关键词: 活血化瘀复元活血汤成骨细胞碱性磷酸酶
分类号: R274.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：探讨中医活血化瘀中药制剂对大鼠成骨细胞功能作用影响及其机制,为中医活血化瘀法促进骨折愈合提供依据。方法：选用中医活血化瘀代表方复元活血汤含药血清为药物组,空白大鼠含药血清为空白组,个别指标用10%胎牛血清为对照组。采用血清药理学方法培养大鼠成骨细胞,分别在培养第1,2,3,4,5天做MTT法细胞增殖功能测定、PNPP法ALP活性测定、AKP法成骨细胞碱性磷酸酶定量测定以及第3,5,7,9,12,15天做茜素红染色矿化结节计数。通过对各项指标随时间变化的观察以及各组之间对比来探索复元活血汤含药血清对大鼠成骨细胞功能作用影响及其机制。结果：MTT法细胞增殖功能测定显示三组血清对成骨细胞增殖作用具有显著差异,两组老鼠血清组的增殖作用大于胎牛血清组,含药血清组的增殖作用大于空白血清组；PNPP法ALP活性测定显示两组老鼠血清组的促分化作用与胎牛血清组相比具有显著差异,但含药血清组的促分化作用与空白血清组相比短期差异不明显；茜素红染色矿化结节计数显示药物组和空白组矿化结节计数在第7,9,12,15d时具有显著差异(p<0.05)；AKP法成骨细胞碱性磷酸酶定量测定显示各天药物组和空白组血清促进成骨细胞分泌AKP差异显著,P<0.05；两组促进成骨细胞分泌AKP随时间变化差异显著,P<0.05。结论：复元活血汤含药血清能够通过促进大鼠成骨细胞合成和分泌碱性磷酸酶,促进成骨细胞功能,为活血化瘀中药促进成骨细胞功能及活血化瘀法促进骨折愈合提供了依据。

全文目录

提要  3-4
ABSTRACT  4-8
引言  8-10
材料和方法  10-15
  1 主要实验试剂及配制  10
    1.1 实验试剂  10
    1.2 主要液体配制  10
  2 主要试验仪器  10-11
  3 实验动物  11
  4 试验药物复元活血汤组方及制备  11
  5 动物分组及含药血清制备  11-12
    5.1 动物分组  11
    5.2 给药  11
    5.3 血清制备  11-12
  6 成骨细胞的分离培养  12
    6.1 大鼠成骨细胞原代培养方法  12
    6.2 三次传代培养  12
  7 成骨细胞的鉴定  12-13
    7.1 成骨细胞的形态学鉴定  12-13
    7.2 成骨细胞的碱性磷酸酶染色  13
  8 MTT法测定最佳含药血清浓度  13
  9 含药血清培养成骨细胞指标观察  13-15
    9.1 成骨细胞增殖功能测定(MTT法)  13
    9.2 成骨细胞分化功能测定(碱性磷酸酶酶比活性PNPP法)  13
    9.3 成骨细胞矿化功能测定(矿化结节计数法)  13-14
    9.4 成骨细胞碱性磷酸酶定量测定(AKP法)  14-15
统计学方法  15-16
试验结果  16-22
  1 成骨细胞的鉴定  16-17
    1.1 成骨细胞的形态学观察  16-17
    1.2 成骨细胞的碱性磷酸酶染色  17
  2 最佳含药血清浓度测定(MTT法)  17-18
  3 成骨细胞增殖功能测定(MTT法)  18-19
  4 成骨细胞分化功能测定(PNPP法)  19
  5 成骨细胞矿化功能测定(矿化结节计数法)  19-20
  6 成骨细胞碱性磷酸酶定量测定(AKP法)  20-22
讨论  22-27
  1 试验方法选择的原理及其适应性  22-24
  2 活血化瘀法促进骨折愈合的机制探讨  24-26
    2.1 活血化瘀代表方复元活血汤的组成与药理作用研究  24-25
    2.2 活血化瘀法促进骨折愈合的机理探讨  25-26
  3 对本实验的评价和展望  26-27
    3.1 对本实验的评价  26
    3.2 进一步研究的问题及展望  26-27
结论  27-28
参考文献  28-31
附录  31-60
致谢  60-61
论文著作  61-66
详细摘要  66-70

中医活血化瘀法影响骨折愈合的基础研究

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