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白头翁汤对炎症性肠病模型大鼠NF-κB表达的影响及溃疡性结肠炎临床分析

作　者: 魏艳
导　师: 梁超
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 炎症性肠病 NF-κBp65 NF-κBp50 白头翁汤
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 108次
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内容摘要

目的：以TNBS(三硝基苯磺酸)灌肠诱导大鼠形成炎症性肠病(IBD)模型,通过检测髓过氧化物酶(MPO)的水平及测定NF-KBp65及p50表达,探讨白头翁汤对大鼠炎症性肠病急性期的疗效机制。方法：雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、白头翁低剂量组、白头翁高剂量组、美沙拉嗪组,以75mg/kg剂量灌肠造模24小时后,除正常对照组及模型组给予0.9%生理盐水外,分别给予白头翁汤低剂量、高剂量及阳性对照药物,各组灌胃均每日1次,共14日,同时观察大鼠腹泻、便血情况并记录体重改变,于造模后第16日处死实验动物并取材。疗程结束后股动脉取血检测血清C反应蛋白(CPR)及大鼠结肠组织测定MPO的水平,并作免疫组化、免疫印迹(Western Blotting)、PCR观察NF-KBp65、p50蛋白及其基因的表达。结果：与正常对照组比较,其他各组大鼠结肠黏膜大体和组织学评分以及MPO活性均增高(P<0.05),与模型组比较,各用药组大鼠结肠黏膜大体和组织学评分以及MPO活性均降低(P<0.05)。血清C反应蛋白无统计学意义。结果显示模型组结肠组织NF-KBp65的蛋白表达高于正常组,而NF-KBp50低于正常组(P<0.05)；中药低剂量组、高剂量组NF-KBp65的蛋白表达低于模型组,中药低剂量组、高剂量组NF-KBp50的蛋白表达均高于模型组,而阳性对照组的NF-κBp50低于模型组(P<0.05)。模型组结肠组织NF-ΚBp65的mRNA水平表达高于正常对照组(P<0.01),而NF-ΚBp50的mRNA水平表达低于正常对照组(P<0.05)；中药高剂量组、低剂量组及阳性对照组的表达低于模型组,白头翁汤高剂量组、低剂量组NF-ΚBP50的表达均高于模型组,阳性对照组NF-ΚBp50的mRNA水平低于模型组、中药高剂量组及中药低剂量组(P<0.05)。结论：白头翁汤高剂量组能降低NF-ΚBp65及其mRNA的表达同时增强NF-ΚBp50及其mRNA的表达,可能是其疗效之一,但与5-氨基水杨酸的治疗机制可能不同。

全文目录

中文摘要  5-7
Abstract  7-9
缩略词表  9-10
1 引言  10-12
2 白头翁对炎症性肠病模型大鼠NF-κB表达的影响  12-41
  2.1 材料与方法  12-22
    2.1.1 实验动物  12
    2.1.2 实验药物制备  12
    2.1.3 实验试剂  12-14
    2.1.4 主要仪器  14
    2.1.5 常用液体配制  14-16
    2.1.6 TNBS炎症性肠病动物模型制备  16-17
    2.1.7 实验分组及处理  17
    2.1.8 评价损伤程度  17-19
      2.1.8.1 大体组织损伤评分  17-18
      2.1.8.2 髓过氧化物酶(MPO)活性检测  18
      2.1.8.3 血清C反应蛋白(CRP)测定  18
      2.1.8.4 粪便隐血检测  18-19
    2.1.9 NF-κBp65及p50蛋白表达检测方法  19-20
      2.1.9.1 免疫组化法  19
      2.1.9.2 免疫印迹(western blotting)  19-20
    2.1.10 逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测NF-κBp65及p50基因表达  20-22
      2.1.10.1 RNA的提取  20-21
      2.1.10.2 引物设计  21-22
      2.1.10.3 实验流程  22
    2.1.11 统计学方法  22
  2.2 实验结果和分析  22-25
    2.2.1 临床表现  22-24
    2.2.2 蛋白表达分析  24
      2.2.2.1 免疫印迹(Western blotting)  24
      2.2.2.2 免疫组化染色结果  24
    2.2.3 RNA的表达分析  24-25
  2.3 讨论  25-40
    2.3.1 IBD的流行病学研究  25-26
    2.3.2 IBD的病因及发病机制  26-30
      2.3.2.1 遗传因素  26-27
      2.3.2.2 环境因素  27-29
      2.3.2.3 免疫因素  29-30
    2.3.3 NF-κB的研究  30-32
      2.3.3.1 NF-κB的分子生物学特征  30-31
      2.3.3.2 NF-κB的激活  31-32
    2.3.4 NF-κB与IBD的关系  32-35
    2.3.5 炎症性肠病模型的选择  35-36
    2.3.6 MPO的临床意义  36
    2.3.7 祖国医学对IBD的认识  36-38
    2.3.8 白头翁汤的方解及现代药理研究  38-40
  2.4 结论  40
  2.5 问题与展望  40-41
3 溃疡性结肠炎60例临床分析  41-52
  3.1 材料与方法  41-42
    3.1.1 溃疡性结肠炎的诊断标准  41-42
    3.1.2 研究对象  42
    3.1.3 方法  42
    3.1.4 收治病例绝对数计算方法  42
    3.1.5 统计方法  42
  3.2 结果  42-48
    3.2.1 一般资料  42-43
    3.2.2 临床特征  43-45
      3.2.2.1 临床表现  43
      3.2.2.2 溃疡性结肠炎患者不同病变部位临床症状发生率  43-45
      3.2.2.3 临床类型  45
      3.2.2.4 临床轻重程度  45
      3.2.2.5 病变范围  45
    3.2.3 相关实验室检查  45-46
    3.2.4 肠镜及病理表现  46
    3.2.5 中医病名及证型诊断  46-47
    3.2.6 治疗方法及疗效  47-48
  3.3 讨论  48-51
    3.3.1 一般情况  48
    3.3.2 临床特点  48-49
    3.3.3 相关辅助检查  49-50
    3.3.4 中医病名诊断及证型诊断  50-51
    3.3.5 治疗  51
  3.4 结论  51-52
参考文献  52-58
致谢  58-59
附录一综述  59-65
  参考文献  62-65
附图  65-66
附录二在校在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  66-67

白头翁汤对炎症性肠病模型大鼠NF-κB表达的影响及溃疡性结肠炎临床分析

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