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激发CD40信号对人肺癌细胞的生物学作用及其机制研究

作　者: 王天立
导　师: 黄建安
学　校: 苏州大学
专　业: 呼吸内科学
关键词: CD40-CD40配体肺癌细胞株流式细胞术肿瘤坏死因子受体相关因子
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

目的探讨激发CD40信号对人肺癌细胞株的生物学作用及其相关机制。方法以人肺癌细胞株H460、A549和SPC-A-1为研究对象，以可溶性CD40配体（sCD40L）及激发型CD40单克隆抗体（5C11）激发肺癌细胞中的CD40信号，采用四氮唑盐（MTT）比色、³H标记胸腺脱氧嘧啶核苷（³H-TdR）掺入法检测激发CD40信号对肺癌细胞增殖的影响，免疫荧光标记和流式细胞术测定细胞表型、细胞周期、细胞内肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAFs）表达谱及细胞凋亡的改变，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定sCD40L对凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。在CD40激发前后加入化疗药物顺铂（DDP）或丝裂霉素（MMC），MTT比色法测定CD40激发前后化疗药对细胞增殖的影响，流式细胞术测定CD40激发前后化疗药物对肺癌细胞的杀伤作用。结果（1）激发CD40信号可抑制表达CD40细胞H460、A549的增殖。（2）激发CD40信号72h后，H460、A549细胞表面CD49e、CD54、TNFR Ⅰ及CD95L的表达明显升高，而TNFRⅡ的表达下降（与对照组比较P＜0.05）。激发CD40信号可下调H460、A549细胞中TRAF2、3、5、6的表达（P＜0.05）。（3）激发CD40信号后，H460、A549细胞中G₁期细胞比例增加，S期细胞比例减少（P＜0.05）。（4）激发CD40信号短期（72h）内并不引起H460、A549细胞明显凋亡，但可上调Bax基因的表达。（5）激发CD40信号可增强DDP及MMC对H460、A549细胞增殖的抑制并增强DDP及MMC对H460、A549的杀伤力（P＜0.05）。（6） CD40阴性的细胞株SPC-A-1经sCD40L或5C11处理后无上述变化（P＞0.05）。结论激发CD40信号可引起表达CD40的肺癌细胞H460、A549生长抑制以及细胞周期、细胞表型和TRAF表达谱改变，并可引起凋亡相关基因Bax表达的改变。同时激发CD40信号可增强H460、A549细胞对化疗药物DDP及MMC的敏感性，提示CD40信号对CD40表达阳性肺癌细胞的生物学行为具有重要调节作用。

全文目录

引言  10-12
第一部分激发CD40信号对人肺癌细胞株的生物学作用及其机制研究  12-30
第二部分激发CD40信号对人肺癌细胞化疗敏感性影响的实验研究  30-40
结论  40-41
缩写词表  41-42
研究生学习期间发表或待发表的论文  42-43
本研究所获的基金资助  43-44
CD40-CD40L在肿瘤中的生物学作用及其临床应用  44-57
致谢  57

激发CD40信号对人肺癌细胞的生物学作用及其机制研究

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