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压力联合干细胞因子对体外干细胞扩增的影响
作 者: 王光富
导 师: 苏海
学 校: 江西医学院
专 业: 心血管
关键词: 单个核细胞 CD34 压力 扩增 干细胞因子
分类号: R329.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2004年
下 载: 13次
引 用: 0次
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内容摘要
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目的 目前体外扩增干/祖细胞（HSC/HPCs）主要采用细胞因子，本实验旨在探讨压力刺激对干/祖细胞体外扩增效率的影响。方法 细胞：采用密度梯度离心法，分离人脐血单个核细胞（Mononuclear Cells，MNCs）。 分组：分为3组。对照组(P0组)在37℃、5%CO2、饱和湿度、大气压的条件下培养，培养基为加入终浓度50ng/ml的重组人干细胞因子（Stem Cell Factor，SCF）的低糖、低血清DMEM；60mmHg压力组（P60组）和120mmHg压力组（P120组）每天分别在60mmHg和120mmHg压力条件下培养12个小时，其余条件同对照组。观察指标：每天显微镜下观察细胞生长状况，于培养的第1、3、5、7天取样，计测MNCs的总数；收集细胞用CD34荧光抗体标记后，流式细胞仪检测CD34+细胞的百分数，计算CD34+细胞总数，CD34+细胞增长倍数。结果 培养第3天，三组MNCs总数均比扩增前减少将近一半，此后，维持相对恒定，但各组间MNCs总数没有差别；各组3、5、7天的CD34+细胞百分数和CD34+细胞总数均比扩增前明显增加，并呈逐渐增长趋势；第3天P120组的CD34+细胞百分数（7.23±0.88 vs 5.82±0.68，p<0.05）和CD34+细胞总数（52.88±9.81 vs 38.06±5.62，p<0.05）均明显高于P0组，同时也高于P60组，但P60组与P0组之间未见明显差异；第5天上述参数分别为：24.39±2.89 vs 17.53±5.20（p<0.05）和152.64±22.74 vs 101.29±25.51（p<0.05），第7天为：29.91±2.92 vs 24.85±3.97（p<0.05）和182.42±26.05 vs 141.73±19.14（p<0.05），P120组较P60组、P0组的扩增效果更好，但P60组与P0组无明显差别； 第7天时，P120组、P60组、P0组CD34+细胞总数分别较扩增前增长8.51±1.21、7.08±1.07和6.61±0.89倍。120mmHg压力条件的培养5天的扩增的倍数与大气压7天相当。结论 120mmHg压力培养可以增加脐血中CD34+细胞体外扩增的速度，而60mmHg压力的效果不明显。
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全文目录
中英文缩略表 3-4
中文摘要 4-5
英文摘要 5-7
前言 7-9
材料与方法 9-14
结果 14-17
讨论 17-22
结论 22
致谢 22-23
参考文献 23-27
附图 27-28
综述 28-34
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学 > 人体细胞学
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