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番茄采后病害拮抗酵母菌的筛选和应用

作　者: 周防震
导　师: 邓伯勋；彭振坤
学　校: 华中农业大学
专　业: 果树学
关键词: 拮抗酵母菌筛选采后病害生物控制番茄
分类号: S476
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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引　用: 5次
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内容摘要

番茄采后的腐烂一直是困扰番茄业发展的一个大问题。目前所广泛使用的化学杀菌剂存在着农药残留、污染环境、病菌抗药性等诸多弊端。生物防治是近年来被证明很有成效的新途径，它主要是利用微生物之间的拮抗作用，选择对农产品不造成危害的微生物来抑制引起采后腐烂的病原真菌的生长。本研究以植物微生态系统为理论，从几种果实表面附生微生物群中分离得到240个酵母菌株。利用离体筛选(in vitro)方法和采后果实接种试验法(in vivo)，选出具有较强抑菌作用，能够分别显著降低采后番茄早疫病和根霉腐烂病的两个菌株L-1-6和H-2。以这两株酵母为拮抗菌对番茄的贮藏防腐保鲜效果进行了研究。并对拮抗菌L-1-6在番茄果面和伤口的生长动态以及钙离子的影响作了研究。主要结果如下： 1．通过平板筛选法(in vitro)，筛选出11株酵母菌对番茄早疫病(Alternaria alternata)有拮抗作用。等体积混菌试验表明，11株酵母菌中有7株酵母菌，浓度为10~6、10~7和10~8CFU/mL三种浓度时，能完全抑制10~5、10~4、10~3spores/mL三种浓度的交链孢霉生长。通过果实接种试验法(in vivo)发现，酵母菌菌株L-1-6能够高度抑制早丰、上海903和西优5号三个品种番茄早疫病的发生，平均抑制率达到77.8％。 2．通过平板筛选法(in vitro)，筛选出9株酵母菌对番茄根霉腐烂病(Rhizopus nigricans)有拮抗作用。等体积混菌试验表明，这9株酵母菌菌株中有7个菌株，浓度为10~8 CFU／mL时，能完全抑制浓度为10~5 spores／mL的根霉的生长；其中PG2-5、F-2-2、PG2-3、PG2-4和H-2-1共5个菌株，菌株浓度为10~7CFU／mL时，能完全抑制浓度为10~4 spores／mL的根霉的生长。西优5号番茄果实接种酵母菌和根霉3d后，酵母菌菌株H-2处理的果实，伤口腐烂率为33.33％，显著低于对照和其他酵母菌株。 3．in vitro条件下对番茄采后某种病害有较好拮抗效果的酵母菌菌株，in vivo条件下不一定表现较好拮抗效果；反过来，in vitro条件下对番茄采后某种病害拮抗效果较差的酵母菌菌株，in vivo条件下可能会表现较好拮抗效果。因此采后拮抗酵母菌的筛选中，活体筛选较之离体筛选更为重要。 4．用浓度为1.0×10~6CFU／mL的拮抗菌悬浮液浸泡绿熟期海粉901番茄果实2min，常温贮藏20d。试验表明，拮抗菌L-1-6或H-2悬浮液处理均能延迟病害发生，腐烂率、失水率和总损耗均明显低于对照，好果率分别为80％和58.3％，而对照为40％；等体积混合浓度为1.0×10~6CFU／mL的拮抗菌L-1-6和H-2悬浮液处理果实，表现为增加腐烂的发生。单一使用L-1-6或H-2拮抗菌悬浮液处理对果实营养成分含量和感官品质没有不良影响。 5．酵母类拮抗菌在室温条件下都能迅速在果实伤口和果面定殖。果实伤口接华中农业大学硕士学位论文种20”L3.0xl护cFu/mL酵母菌L一1一6拮抗菌45h后，伤口酵母菌数量可增加541倍。浓度为2.0 Xl护cFu/mL酵母菌L一1一6拮抗菌悬浮液浸果45h后，番茄果面酵母菌数量可增加n.2倍。两种情况下，2%CaO:配合酵母菌使用均能取得明显增强效果，分别增加761倍和14.6倍。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
1 引言  9-20
  1.1 酵母菌作为生防菌的提出  9-13
  1.2 酵母菌对果蔬采后病害的防治效果  13-15
  1.3 酵母菌对果蔬采后病害的防治机理  15-18
    1.3.1 营养或空间的竞争  15-16
    1.3.2 对病原菌的直接寄生作用  16-17
    1.3.3 诱导寄主产生抗病性  17-18
    1.3.4 对病原菌的抗生作用  18
  1.4 本研究的目的和意义  18-20
2 材料和方法  20-23
  2.1 番茄采后病原菌的分离、纯化  20
  2.2 拮抗菌酵母的分离和纯化  20
  2.3 拮抗菌酵母的筛选  20-21
    2.3.1 离体筛选(in vitro)  20-21
    2.3.2 活体筛选(in vivo)  21
  2.4 拮抗菌处理番茄贮藏试验  21-22
    2.4.1 拮抗菌酵母悬浮液的配制  21-22
    2.4.2 果实处理及测定  22
  2.5 拮抗菌在番茄上的生长动态  22-23
    2.5.1 拮抗菌在番茄果实伤口的生长动态  22
    2.5.2 拮抗菌在番茄果实表面的生长动态  22-23
3 结果与分析  23-34
  3.1 离体拮抗(in vitro)实验  23-27
    3.1.1 琼脂块平板法筛选  23-24
      3.1.1.1 交链孢霉拮抗菌琼脂块平板法筛选  23-24
      3.1.1.2 根霉拮抗菌的琼脂块平板法筛选  24
    3.1.2 混菌培养法离体筛选  24-27
      3.1.2.1 交链孢霉拮抗菌与交链孢霉的混菌培养  24-26
      3.1.2.2 根霉拮抗菌与根霉的混菌培养  26-27
  3.2 活体筛选(in vivo)试验  27-28
    3.2.1 交链孢霉拮抗菌的活体筛选  27
    3.2.2 根霉拮抗菌的活体筛选  27-28
  3.3 拮抗菌处理番茄贮藏试验  28-33
    3.3.1 两株拮抗菌的防腐贮藏效果  28-31
    3.3.2 两株拮抗菌对贮藏番茄营养成分含量的影响  31-32
    3.3.3 两株拮抗菌对贮藏番茄果实感官品质的影响  32-33
  3.4 拮抗菌在番茄上的生长动态  33-34
    3.4.1 拮抗菌在番茄果实伤口上的生长动态  33
    3.4.2 拮抗菌在番茄果实表面上的生长动态  33-34
4 讨论  34-37
  4.1 拮抗菌酵母的分离  34
  4.2 拮抗菌酵母的筛选  34-35
  4.3 拮抗菌酵母的抑菌机理  35-36
  4.4 拮抗菌酵母的应用  36-37
参考文献  37-44
致谢  44-46

番茄采后病害拮抗酵母菌的筛选和应用

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