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高糖高脂对体外培养大鼠肾小球系膜细胞的影响

作　者: 许诣
导　师: 文秀英
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 肾小球系膜细胞 高糖高脂 固醇调节元件结合蛋白 脂肪酸合成酶 乙酰辅酶A羧化酶
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 37次
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内容摘要


目的:观察高糖高脂对体外培养大肾小球系膜细胞的影响。方法:选用肾小球系膜细胞系(HBZY-1),常规培养于37℃, 5%CO2含10%灭活胎牛血清的DMEM培养液中,细胞融合90%时进行传代,每2～3天传代一次,将处于对数生长期的(2-4代)系膜细胞接种于培养板中,含0.5%血清培养基同步化24h后,分组处理如下:正常对照组(5.5mM葡萄糖),高糖组(20mM葡萄糖),高脂组(5.5mM葡萄糖+0.2mM palmitate),高糖高脂组(20mM葡萄糖+0.2mM palmitate):1. MTT法,流式细胞术测定系膜细胞增殖。2.收集各组细胞及培养上清液,酶联免疫吸附(ELISA)法测试培养上清液中FN,TGF-β1含量。3.酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞内甘油三酯含量。4. Western Blot检测SREBP-1a、ACC和FAS蛋白含量的检测。结果: 1.各组细胞增殖的结果:在一定时间内,与正常对照组比较,高糖抑制细胞增殖(P<0.01),高脂和高糖高脂能够刺激细胞增殖(P<0.05)。2.各组细胞培养液上清TGF-β1、FN含量的变化:各组细胞处理48h后,高糖组TGF-β1含量明显降低(P<0.01);高脂组,高糖高脂组TGF-β1含量明显升高(P<0.01)。各组细胞处理24h后,各组细胞培养液上清FN含量无明显差异;各组细胞处理48h后,与同时段正常对照组比较,高糖,高脂组FN含量无明显差异;与同时段正常对照组比较,高糖高脂组FN含量明显增加(P<0.05)3.各组细胞内甘油三酯TG含量的变化:各组细胞处理48h后,与正常对照组相比,高糖组HBZY-1细胞TG含量无明显改变;高脂组细胞TG含量显著增高(P<0.05);高糖高脂组细胞TG含量明显增加(P<0.01)4.各组细胞SREBP-1a、ACC和FAS蛋白的表达:各组细胞处理48h后,与正常对照组相比,高脂和高糖高脂组细胞SREBP-1a、ACC和FAS蛋白的表达均明显升高(P<0.01 or P<0.05)。与高糖,高脂组相比,高糖高脂组细胞SREBP-1a、ACC和FAS蛋白的表达均升高(P<0.05 or P<0.01)结论:在一定时间内,高糖能够抑制肾小球系膜细胞(HBZY-1)的增殖,而高脂、高糖高脂能够刺激细胞增殖,增加细胞内甘油三酯含量。其机制可能为高脂、高糖高脂上调脂质合成相关基因SREBP-1、ACC和FAS的表达,刺激细胞因子TGF-β1、FN的表达有关。

全文目录


中英文缩写词  5-7
中文摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
材料和方法  13-20
结果  20-24
讨论  24-26
结论  26-27
参考文献  27-31
综述  31-42
  参考文献  37-42
致谢  42

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病
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