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持续性压力通过影响ERK1/2和GIT1的结合促进大鼠成骨细胞的迁移

作　者: 史亮亮
导　师: 殷国勇
学　校: 南京医科大学
专　业: 骨科
关键词: 成骨细胞 持续性压力 ERK1/2 GIT1 PP2
分类号: R68
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 16次
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内容摘要


目的:探讨持续压力对体外培养的大鼠成骨细胞内ERK1/2及GIT1蛋白相互关系及对大鼠成骨细胞迁移能力的影响。方法:取1～2d龄SD大鼠颅盖顶骨进行成骨细胞原代培养,采用压缩空气在密闭容器内对第2代细胞施以300kPa的静压力,分别于未加压,加压1/2h、1h、2h后提取细胞总蛋白, Western blot检测各组成骨细胞在Src抑制剂PP2不干预和干预下ERK1/2和GIT1的表达及其磷酸化,免疫共沉淀分析GIT1同活化的ERK1/2(phospho-ERK1 /2,pERK1/2)相互关系的变化。细胞免疫荧光分析pERK1 /2在成骨细胞内的定位表达。Image pro plus 5.0软件检测成骨细胞在Src抑制剂PP2不干预和干预下加压前后的面积。结果:Westernblot结果显示pERK1/2和pGIT1的表达在持续加压组较对照组明显增加; PP2干预后持续加压组的成骨细胞内的pERK1/2和pGIT1表达较对照组无统计学差异;免疫共沉淀结果显示GIT1-pERK1/2结合力在持续加压组明显增强;细胞荧光结果显示加压组pERK1/2在成骨细胞细胞浆表达较对照组和PP2组显著增加。持续加压后成骨细胞面积增加;PP2干预下持续加压后成骨细胞面积较对照组无统计学差异。结论:300kPa左右的持续性压力能通过激活src的活性,从而诱导ERK1/2,GIT1的磷酸化,同时增加pERK1/2和GIT1的相互结合,促进大鼠成骨细胞的迁移,Src—GIT1/ERK1/2途径可能是成骨细胞力学信号转导过程中的重要通路之一。

全文目录


缩略语  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
引言  9-10
资料与方法  10-32
结果  32-42
分析与讨论  42-45
小结  45-46
参考文献  46-49
综述  49-61
  参考文献  55-61
攻读学位期间发表情况  61-62
致谢  62

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学（运动系疾病、矫形外科学）
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