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利用外源蛋白酶失活大豆中抗原蛋白的研究

作　者: 贾振宝
导　师: 霍贵成
学　校: 东北农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 大豆 β-伴球蛋白过敏水解
分类号: TQ93
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
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引　用: 10次
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内容摘要

大豆在我国种植面积广泛，蛋白质含量高，是畜禽生产中最重要的蛋白质来源。但是大豆中含有的抗原蛋白会在幼畜体内引起过敏反应导致腹泻甚至死亡。目前生产中常用的蒸汽加热处理并不能有效失活大豆中的抗原蛋白。本课题针对这一问题，采用凝胶过滤的方法从大豆中分离纯化一种重要的抗原蛋白—β—伴球蛋白，建立定量检测β-伴球蛋白的方法，并对利用蛋白酶失活大豆中β-伴球蛋白进行分析研究。采用70％～90％分级盐析和琼脂糖凝胶Sepharose 6B(80×2.5cm)纯化大豆中的β-伴球蛋白，具有较好的分离效果。免疫电泳的结果证实所提取的β-伴球蛋白纯度较高，大豆中的其它成分与β-伴球蛋白抗血清无交叉免疫反应。SDS—PAGE的结果表明本实验所提取的β-伴球蛋白是由不同形式单体组成的复合物，共有六种亚基组成，分子量分别为72746Da、67747Da、63998Da、60249Da、57750Da、52751Da和68000Da。利用β-伴球蛋白的抗血清，通过免疫火箭电泳，建立了定量检测β-伴球蛋白的方法，回归模型： H=0.0681C+0.4571 R~2=0.994 H—沉淀峰高度(mm) C—β-伴球蛋白浓度(μg/mL) 分别用Alcalase、Nutrase、AS1.398和木瓜蛋白酶水解豆粕至水解度为5％，豆粕中β-伴球蛋白的含量分别为57.6mg/g、58.2mg/g、58.0mg/g和56.4mg/g，结果表明上述四种蛋白酶在水解β-伴球蛋白的特异性上无明显差别。以Alcalase作为水解用酶，比较不同水解度下豆粕中β-伴球蛋白的残留量，实验结果表明水解度小于10％时，水解对豆粕中β-伴球蛋白的含量影响较小，当水解度达到25％时，可使豆粕中的β-伴球蛋白完全消失。水解并不能提高豆粕中β-伴球蛋白对胃蛋白酶的敏感性。综上所述，酶解可有效失活大豆中的抗原蛋白，这为生产低过敏大豆制品提供了新的方法和手段。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
1 前言  7-14
  1．1 研究目的及意义  7-8
  1．2 研究现状  8-13
  1．3 研究内容  13-14
2 材料与方法  14-21
  2．1 材料与试剂  14-15
  2．2 实验方法  15-21
3 结果与讨论  21-33
  3．1 β-伴球蛋白的分离纯化  21-23
  3．2 抗血清的制备  23-24
  3．3 蛋白质纯度鉴定  24-25
  3．4 蛋白质分子量的测定  25-27
  3．5 豆粕中β-伴球蛋白含量的测定  27-28
  3．6 酶解失活β-伴球蛋白的研究  28-33
4 结论  33-34
参考文献  34-38
致谢  38

利用外源蛋白酶失活大豆中抗原蛋白的研究

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