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硫酸镁对大鼠继发性脊髓损伤保护作用的实验研究

作　者: 王鑫渊
导　师: 刘维钢
学　校: 石河子大学
专　业: 外科学
关键词: 硫酸镁脊髓损伤凋亡细胞
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:通过建立大鼠继发性脊髓损伤模型,检测经过硫酸镁治疗后大鼠受损脊髓组织水及钙、镁粒子含量的变化,观察组织病理学改变,超微结构改变以及单位面积凋亡细胞数目的多少,探讨硫酸镁对大鼠继发性脊髓损伤的保护作用及机制。方法:30只体重280±20g Wister成年雄性大白鼠随机分为3组:每组10只,A组(对照组);B组(损伤组);C组(治疗组)。A组行椎板减压暴露硬脊膜后予以止血缝合伤口。B、C组则制作成Allen’s重物打击的脊髓损伤模型。脊髓损伤后30min,B组腹腔注射蒸馏水1600mg/kg, C组腹腔注射硫酸镁1600mg/kg。待48h后每组随机抽取8只大鼠麻醉后处死,从原切口显露脊髓,以打击处为中心切取损伤段脊髓组织长约1.5cm,将标本前1/3用10%福尔马林固定24h后取出,石蜡包埋,切取5μm厚度的切片,常规HE染色,镜下观察组织形态学变化。后2/3作水、钙、镁含量测定。从每只大鼠的切片中随机抽取两张,按照相关步骤作TUNEL染色。每组选5张切片,每张切片前角区任选5个视野,来测定单位面积1mm2内的阳性细胞数。将每组剩余的2只大鼠麻醉后处死,取损伤段脊髓,制作电镜标本,超微切片70nm,在透射电镜下观察。结果:损伤组伤段脊髓含水量均高于正常组(P<0.01),B组伤段脊髓含水量高于C组(P<0.05);B、C组伤段脊髓钙含量均高于A组(P<0.01),B组钙含量高于C组(P<0.05);B、C组伤段脊髓镁含量均低于A组(P<0.01),B组镁含量低于C组(P<0.05)。组织病理学检查所见:对照组脊髓组织灰白质界限清楚,神经元和髓鞘结构正常。损伤组灰白质界限模糊,大片状出血、水肿坏死区、灰质中神经元减少,白质出现网状脱髓鞘,部分尼氏小体及细胞核消失。治疗组脊髓组织出血、水肿、网状脱髓鞘明显轻与损伤组。TUNEL染色细胞凋亡测定:对照组未见明显的凋亡细胞;损伤组可见大量的凋亡细胞;治疗组的凋亡细胞明显少于损伤组(P<0.01)。电镜观察所见:损伤组神经细胞体积明显缩小,细胞膜尚完整,胞浆内多聚核糖体减少丰富,内质网呈囊泡状扩张,线粒体嵴间隙扩张,凋亡细胞易见,神经纤维脱髓鞘明显;治疗组结构破坏明显轻于损伤组,即神经细胞形态基本正常,细胞膜尚完整,胞浆内内质网呈小囊泡状扩张,线粒体嵴结构清楚,神经纤维脱髓鞘现象减轻;对照组脊髓前角神经细胞形态正常,胞核清楚。结论:硫酸镁具有抗组织水肿、抗神经细胞凋亡的作用,起到了减轻兴奋性氨基酸的作用。病程早期应用硫酸镁可以减轻脊髓损伤后的继发性损伤,从而对受损脊髓起到保护作用。

全文目录

中文摘要  6-7
Abstract  7-9
缩略词表  9-10
前言  10-12
材料和方法  12-17
  1 材料  12-13
  2 方法  13-17
结果  17-19
  1. 损伤段脊髓组织含水量的变化  17
  2. 损伤段脊髓组织中 Mg~(2+)含量变化  17
  3. 损伤段脊髓组织 Ca~(2+)含量变化  17
  4. 组织病理学检查结果  17-18
  5.TUNEL 染色细胞凋亡测定结果  18
  6 电镜观察结果  18-19
附图  19-25
附表  25-26
讨论  26-35
  1. 继发性脊髓损伤的可能机制  26-29
  2. 兴奋性氨基酸在继发性脊髓损伤中的毒性作用  29-30
  3. 硫酸镁对继发性脊髓损伤的保护机制  30-31
  4. 硫酸镁对神经细胞凋亡的抑制作用  31-35
结论  35-36
参考文献  36-40
文献综述  40-46
  参考文献  44-46
作者简介  46
攻读硕士学位期间发表的文章  46-47
致谢  47-48
导师评语  48

硫酸镁对大鼠继发性脊髓损伤保护作用的实验研究

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