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白僵菌工业化生产与防治天牛技术的研究

作　者: 胡加付
导　师: 李增智；樊美珍
学　校: 安徽农业大学
专　业: 森林保护学
关键词: 白僵菌固态发酵工业化生产生物防治松褐天牛光肩星天牛
分类号: S763.38
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
下　载: 275次
引　用: 6次
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内容摘要

为了改变我国目前白僵菌（Beauveria）作坊式生产的状况，提供大批量优质高效的白僵菌产品，本文对白僵菌的工业化生产和白僵菌的新剂型——无纺布菌条的制作技术进行了系统的研究。同时，通过不同白僵菌菌株和不同放菌方式对松褐天牛（Monochamus alternatus Hope）和光肩星天牛（Aloplophora glabripennis Motschulsky）进行了一系列试验。通过验证前人的研究结果，认为麸皮培养基（6％鼓皮煮汁+1％蔗糖+2％豆饼粉+0.05％K2HPO4）是经济而又适合工业化生产的球孢白僵菌液体种子培养基。用不同pH的培养基培养白僵菌，结果是：pH 6.0-7.0最适合球孢白僵菌的生长，在相同培养时间内菌丝产量最高，过酸或过碱环境都不利于球孢白僵菌的生长。在白僵菌液体发酵过程中，处于迅速生长期的菌丝活力最强，是接种的最佳时期。分别用20℃、25℃和30℃三个不同温度的液体培养基培养球孢白僵菌，每12小时取样测定生物产量并作生长曲线。结果为25℃培养48小时的球孢白僵菌生长速率最高、生物量较大，是接种的最佳时期。以产孢量为指标，通过正交试验筛选白僵菌固态发酵的培养基，结果是：90％麦麸+5％玉米粉+5％黄豆粉的物理性状较好，营养充分，能有效地促进白僵菌的生长和产孢，产孢量达244.7亿/克。在白僵菌用20M~2固体发酵罐进行固态发酵的过程中，通过多次测定培养基含水率发现整个发酵过程损失10％左右的水分。对全麸皮培养基来说，最佳的起始含水率为60—65％。最佳通气条件为：前12小时不通气，12—48小时通气量为1：2，48—144小时的通气量为1：1。而温度只需在12—48±8小时内用风机或罐内管道通冷水进行控制，其它时间不需要降温。用培养基涂片萌发法测定出罐、干燥结束和加工粉碎后三个阶段的活孢率，发现众邦公司现有的干燥和粉碎工艺对白僵菌孢子的损伤太大，生产的终产品基本不合格。用振动流化床（ZLG系列，常州市范群干燥设备有限公司）进行常温干燥，能最大限度地减轻对白僵菌抱子的损伤，活抱率维持在 95％以上，是千燥生物制剂比较合适的设备。白僵菌无纺布菌条是真菌杀虫剂的新剂型，它具有许多方面的优点，我们对无纺布菌条制作技术进行了深入研究，通过测定不同培养条件下无纺一布菌条产抱量的多少，确定制作无纺布菌条的最佳条件为：鼓皮培养基（6 ％鼓皮煮汁＋l％蔗糖＋ 2％豆饼粉＋0．05％KZHPO4＋l％琼脂），接种量 1：3．5，接种温度T＜38oC，培养温度T二25C，湿度90—95％，培养时间为 6—7天，最终产抱量可达 1．2 ｛UcmZ。通过多次生物测定筛选了一株对松褐天牛成虫毒力较高的菌株Bb202 和两个对光肩星天牛成虫毒力较高的菌株，即球袍白僵菌MT和卵抱白僵菌 ND用于野外防治试验。同时发现金龟子绿僵菌Ma83对两种天牛均表现出稳定的高毒力。在生物测定的基础上，用Bb202菌株采用无纺布菌条和喷高抱粉两种不同的放菌方式对松褐天牛进行了初步的防治试验。结果是：防治后松褐天牛的虫株率下降了 31．l％，解剖木中高抱粉处理区的幼虫死亡率为 74．7％，无纺布菌条处理区为 41二％，而对照区只有 32．3％，说明用白僵菌防治松褐天牛有一定的效果。用MT和ND两个菌株，每个菌株采用无纺布菌条和喷雾两种不同的放菌方式共五个处理，即对照、MT菌条、MT喷雾、ND菌条和ND喷雾对光肩星天牛成虫进行挂笼放菌试验。试验中，每个处理挂30个笼子，每个笼子放 5头（2雄＋3雌）光肩星天牛成虫，野外观察员＼10天。通过不同处理光肩星天牛成虫的产卵刻槽数、死亡率、校正死亡率和感染率的分析比较，结果为：①对照处理的产卵刻槽数为16石个／株，明显高于处理组的产卵刻槽数；ND菌株处理的产卵刻敞为 8．9个／＄，比 MT菌株的产卵刻槽数（l．9 个／株）少；但同一菌株不同处理之间的产卵刻槽数差异不显著；②ND菌株的死亡率和校正死亡率均高于MT菌株；同一菌株的不同处理之间，无纺布菌条处理的死亡率和校正死亡率均较喷雾处理高；＠用 ND菌株处理的感染率高于MT菌株，而同一菌株的不同处理之间，感染率差异不明显。因此，在现有四种处理中，ND菌条处理的效果最好。对试验树胸径大小与光肩星天牛产卵刻槽进行相关性分析，并用聚丙烯酞胺凝胶平板电泳法测定由虫尸所得的不同分离株的球抱白僵菌和卵抱白 2 僵

全文目录

中文摘要  4-7
外文摘要  7-11
综述  11-20
引言  20-22
材料和方法  22-34
结果与分析  34-62
  1 白僵菌工业化生产技术的研究  34-41
    1．1 白僵菌工业化生产种子液的培养  34-36
      1．1．1 白僵菌液体培养基配方的确定  34
      1．1．2 白僵菌液体培养最佳pH值的确定  34
      1．1．3 白僵菌种子液最佳培养温度及最佳培养时间的确定  34-36
    1．2 白僵菌固体发酵试验研究  36-41
      1．2．1 白僵菌固体发酵培养基配方的确定  36-38
      1．2．2 白僵菌固体发酵培养基最适含水率的确定  38-39
        1．2．2．1 培养基含水率随发酵时间的变化  38
        1．2．2．2 最适含水率的确定  38-39
      1．2．3 最挂通气量的确定  39
      1．2．4 发酵过程中温度的控制  39-40
      1．2．5 产品干燥工艺与粉碎加工工艺的研究  40-41
  2 白僵菌无纺布菌条制作技术的研究  41-42
    2．1 培养基的确定  41
    2．2 最佳接种量的确定  41-42
    2．3 白僵菌无纺布菌条的制作  42
  3 利用白僵菌防治天牛技术的研究  42-62
    3．1 高毒力菌株的筛选  42-47
      3．1．1 不同菌株对松褐天牛幼虫的毒力生物测定  43-44
      3．1．2 不同菌株对光肩星天牛幼虫的毒力生物测定  44-45
      3．1．3 不同菌株对光肩星天牛成虫的毒力生物测定  45-47
    3．2 白僵菌防治松褐天牛的试验研究  47-48
      3．2．1 试验前后有虫株率的变化  47
      3．2．2 不同处理对松褐天牛虫口密度的影响  47-48
      3．2．3 挂笼防治松褐天牛的试验研究  48
    3．3 挂笼放菌防治光肩星天牛试验一  48-59
      3．3．1 不同处理方式对天牛成虫死亡率和校正死亡率的影响  48-50
      3．3．2 不同处理方式对天牛成虫感染率的影响  50-51
      3．3．3 不同处理方式对光肩星天牛产卵刻槽数的影响  51-52
      3．3．4 光肩星天牛产卵刻槽数与树径胸围大小的相关性分析  52-53
      3．3．5 喷雾孢子和无纺布菌条上的孢子在林间的活孢率变化  53-54
      3．3．6 感染天牛的酯酶同工酶酶型测定  54-57
        3．3．6．1 不同分离株同工酶酶谱的比较  54-55
        3．3．6．2 不同来源白僵菌菌株酯酶同工酶酶谱的聚类分析  55-57
      3．3．7 气象资料分析  57-59
    3．4 挂笼试验二  59-62
      3．4．1 不同处理方式对天牛成虫死亡率和校正死亡率的影响  59-60
      3．4．2 不同处理方式对天牛产卵量的影响  60-62
讨论  62-68
结论  68-70
参考文献  70-78
致谢  78-79
作者简介  79

白僵菌工业化生产与防治天牛技术的研究

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