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烟草RAPD指纹图谱与赤星病和黑胫病抗性基因标记的研究

作　者: 张汉尧
导　师: 郑成木；何川生
学　校: 华南热带农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 烟草 RAPD 遗传多样性 赤星病 黑胫病 分子标记
分类号: S572.034
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
下　载: 151次
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内容摘要


本研究在改良烟草DNA提取方法及优化烟草RAPD程序的基础上，构建了52个烤烟种质的RAPD指纹图谱，结果表明烤烟品种间存在一定的遗传多样性。利用得到的RAPD数据进行了聚类分析，得到了UPGMA分子聚类树。同时对同一品种内的5个不同的单株遗传一致性进行了研究，结果说明同一烤烟品种不同单株间的同质性很强，得到的RAPD指纹图谱可以在品种分类与鉴定、假种辨别中加以应用。另外通过RAPD分析，筛选出了一个与烟草赤星病抗性基因连锁的标记S95760和一个与烟草黑胫病抗性基因连锁的标记S220830。

全文目录


致谢  4-5
中文摘要  5-6
第一章 我国烟草品种资源及其遗传标记研究概况  6-21
  第一节 烟草概述  6-7
  第二节 我国烟草种质资源  7-13
    一、 烟草种质资源的重要作用  8-9
    二、 烟草种质资源的类型和特点  9-12
    三、 烟草种质资源研究  12-13
  第三节、 RAPD在作物资源研究中的应用  13-17
    一、 绘制品种、品系的指纹图谱  14
    二、 种质资源遗传多样性研究  14-15
    三、 构建遗传图谱  15
    四、 种质资源创新的鉴定  15-16
    五、 目标基因的定位与分离  16-17
  第四节 本研究的目的、意义  17-18
  参考文献  18-21
第二章 烟草DNA提取方法的改良和RAPD试验程序优化  21-39
  第一节 烟草RAPD分析中DNA提取方法的改良  22-30
    一、 材料与方法  22-27
      1． 供试材料  22
      2． 仪器设备  22-23
      3． 药品试剂  23
      4． 常用试剂的配制  23-24
      5． 实验方法  24-26
      6． DNA的检测  26-27
      7． RAPD扩增  27
    二、 结果与分析  27-30
      1． 改良CTAB法提取DNA的RAPD扩增效果  27-29
      2． 用改良CTAR法提取不同状态材料的DNA效果及其RAPD扩增结果  29
      3． PVP对DNA提取效果和RAPD扩增结果的影响  29-30
      4． CI抽提对DNA提取效果和RAPD扩增结果的影响  30
  第二节 烟草RAPD的影响因子和程序优化的研究  30-36
    一、 材料与方法  30-32
    二、 结果与分析  32-36
      1． 不同Taq酶浓度对RAPD扩增效果的影响  32
      2． 不同的镁离子浓度对RAPD扩增效果的影响  32-33
      3． 退火温度对RAPD扩增效果的影响  33-34
      4． 循环周期对RAPD扩增效果的影响  34
      5． Primer浓度对RAPD扩增效果的影响  34-35
      6． dNTPs浓度对RAPD扩增效果的影响  35
      7． 其它因子对RAPD扩增效果的影响  35-36
  第三节 讨论  36-37
  参考文献  37-39
第三章 烤烟品种的RAPD指纹图谱构建及分析  39-56
  第一节 烤烟品种的遗传多态性分析（Ⅰ）  40-45
    一、 材料与方法  40-41
    二、 结果与分析  41-45
      1． 烤烟品种的RAPD多态性  41-42
      2． 28份烤烟品种间成对相似系数  42-45
  第二节 烤烟品种遗传多态性分析（Ⅱ）  45-53
    一、 材料与方法  45-47
    二、 结果与分析  47-53
      1． 烤烟品种的RAPD多态性  47
      2． 各烤烟品种间的遗传相似性  47-49
      3． 24个烤烟品种的RAPD指纹图谱及聚类结果  49-50
      4． 同一品种内不同单株间的遗传一致性  50-53
  第三节 讨论  53-54
    一、 系谱分析与RAPD分析的比较  53
    二、 烤烟品种的遗传多态性  53
    三、 RAPD技术应用于烤烟种子纯度测定及品种鉴定的可靠性  53-54
  参考文献  54-56
第四章 烟草抗病基因RAPD标记的筛选  56-67
  第一节 烟草抗赤星病基因RAPD标记的筛选  57-61
    一、 材料与方法  57-58
    二、 结果与分析  58-61
      1． 赤星病抗性基因突变—亲本系的RAPD分析  58-59
      2． 赤星病抗性基因的标记  59-61
  第二节 烟草黑胫病抗性基因RAPD标记的筛选  61-64
    一、 材料与方法  61-62
    二、 结果与分析  62-64
      1． 引物的筛选  62-63
      2． 烟草黑胫病抗性基因的标记  63-64
  第三节 讨论  64-65
  参考文献  65-67
英文摘要  67

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 烟草（菸草）
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