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凤尾菇菌丝体及发酵液抗菌组分的分离及活性研究

作 者: 曾志恒
导 师: 郑怡
学 校: 福建师范大学
专 业: 植物学
关键词: 凤尾菇 液体深层培养 抑细菌 抑真菌 活性物质
分类号: S646
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 55次
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内容摘要


本研究以担子菌纲侧耳属的凤尾菇(Pleurotus sajor-caju)为实验材料,经液体深层发酵培养,得到凤尾菇菌丝体和发酵液。菌丝体经乙醇溶剂浸提,得菌丝体乙醇提取物,再经溶剂萃取。经活性检测,菌丝体粗提物及其萃取相抗细菌抗真菌活性较弱。发酵液经乙酸乙酯和正丁醇分级萃取,显示出较强的抗菌活性,并运用硅胶薄层层析、硅胶柱层析以及Sephadex-LH 20凝胶层析手段,分离得到了数个组分。通过生物活性跟踪实验,从中发现了一些具有较好抗细菌抗真菌活性组分,其中组分EPscl、Npscl对供试细菌的抑制效果较好。组分EPsc4-1对枇杷炭疽病菌菌丝生长和孢子萌发具有较强的抑制活性,半数抑制浓度IC50分别达到0.119mg/mL和0.323mg/mL。经GC-MS分析发现组分EPsc4-1主要活性成可能为萘并[1,2-d]咪唑。通过电镜,观察了组分EPsc4-1对枇杷炭疽病菌菌丝形态和结构的影响。扫描电镜观察,菌丝呈不规则的肿大和缢缩,明显畸形,菌丝生长明显受到抑制。透视电镜结果表明,菌丝细胞壁不规则增厚,细胞原生质不均匀,有较大的空腔形成,囊泡增多,部分菌丝组织坏死。

全文目录


中文摘要  2-3
Abstract  3-4
中文文摘  4-6
目录  6-10
绪论  10-26
第一章 凤尾菇菌丝体乙醇提取物及萃取相抗菌活性  26-34
  1.1 实验材料  26-27
    1.1.1 凤尾菇菌丝体  26
    1.1.2 供试细菌与真菌  26
    1.1.3 培养基  26-27
    1.1.4 实验试剂  27
    1.1.5 实验仪器  27
  1.2 实验方法  27-28
    1.2.1 凤尾菇菌丝体乙醇提取物的制备  27
    1.2.2 凤尾菇菌丝体乙醇提取物的萃取  27-28
    1.2.3 抑制细菌活性实验  28
    1.2.4 抑制植物病原菌活性实验  28
  1.3 结果与分析  28-31
    1.3.1 凤尾菇菌丝体乙醇提取物得率  28-29
    1.3.2 凤尾菇菌丝体乙醇提取物的抑细菌活性  29
    1.3.3 凤尾菇菌丝体乙醇提取物萃取相的抑细菌活性  29-30
    1.3.4 凤尾菇菌丝体乙醇提取物的抑真菌菌丝生长活性  30
    1.3.5 凤尾菇菌丝体乙醇提取物萃取相的抑真菌菌丝生长活性  30-31
  1.4 讨论  31-34
第二章 凤尾菇发酵液萃取物的抗菌活性研究  34-42
  2.1 实验材料  34-35
    2.1.1 凤尾菇发酵液  34
    2.1.2 供试细菌与真菌  34
    2.1.3 培养基  34
    2.1.4 实验试剂  34
    2.1.5 实验仪器  34-35
  2.2 实验方法  35-36
    2.2.1 凤尾菇发酵液萃取物的制备  35
    2.2.2 抑制细菌活性实验  35
    2.2.3 发酵液萃取物的最低抑制质量浓度(MIC)的测定  35
    2.2.4 抑制真菌菌丝生长活性实验  35-36
    2.2.5 抑制真菌孢子萌发活性实验  36
  2.3 结果与分析  36-40
    2.3.1 凤尾菇发酵液萃取物的抑细菌活性  36-37
    2.3.2 凤尾菇发酵液乙酸乙酯萃取物的最低抑制质量浓度(MIC)  37
    2.3.3 凤尾菇发酵液正丁醇萃取物的最低抑制质量浓度(MIC)  37-38
    2.3.4 凤尾菇发酵液萃取物对真菌菌丝生长的抑制作用  38-39
    2.3.5 凤尾菇发酵液萃取物对真菌孢子萌发的抑制作用  39-40
  2.4 讨论  40-42
第三章 凤尾菇发酵液抗细菌组分分离及其活性研究  42-50
  3.1 实验材料  42-43
    3.1.1 凤尾菇发酵液萃取物的制备  42
    3.1.2 供试细菌  42
    3.1.3 培养基  42
    3.1.4 实验试剂  42
    3.1.5 实验仪器  42-43
  3.2 实验方法  43-44
    3.2.1 硅胶薄层层析  43
    3.2.2 发酵液萃取物的硅胶柱层析分离  43-44
    3.2.3 发酵液萃取物组分的活性检测  44
    3.2.4 发酵液萃取物部分组分的GC-MS分析  44
  3.3 结果与分析  44-47
    3.3.1 乙酸乙酯萃取物组分分离及抑菌活性  44-45
    3.3.2 正丁醇萃取物组分分离及抑菌活性  45
    3.3.3 乙酸乙酯萃取物EPsc1组分的GC-MS成分分析  45-46
    3.3.4 正丁醇萃取物NPsc1组分的GC-MS成分分析  46-47
  3.4 讨论  47-50
第四章 凤尾菇发酵液抑枇杷炭疽病菌组分分离及其活性研究  50-62
  4.1 实验材料  50-51
    4.1.1 凤尾菇发酵液萃取物的制备  50
    4.1.2 供试真菌  50
    4.1.3 培养基  50
    4.1.4 实验试剂  50
    4.1.5 实验仪器  50-51
  4.2 实验方法  51-52
    4.2.1 硅胶薄层层析  51
    4.2.2 发酵液萃取物组分分离和活性跟踪  51
    4.2.3 组分EPSC4的Sephadex LH-20凝胶层析和活性检测  51-52
    4.2.4 活性组分的GC-MS分析  52
    4.2.5 扫描电镜样品的制备及样品观察  52
    4.2.6 透视电镜样品的制备及样品观察  52
  4.3 结果与分析  52-60
    4.3.1 乙酸乙酯萃取物分离组分对枇杷炭疽病菌的抑制活性  52-53
    4.3.2 正丁醇萃取物分离组分对枇杷炭疽病菌的抑制活性  53-54
    4.3.3 凝胶层析分离组分对枇杷炭疽病菌的抑制活性  54-55
    4.3.4 组分EPsc4-1对枇杷洃疽病菌菌丝生长的半数抑制浓度(IC_(50))  55-56
    4.3.5 组分EPsc4-1对枇杷炭疽病菌孢子萌发的半数抑制浓度(IC_(50))  56-57
    4.3.6 组分EPsc4-1的GC-MS分析  57
    4.3.7 组分EPsc4-1对枇杷炭疽病菌菌丝形态的影响  57
    4.3.8 组分EPsc4-1对枇杷炭疽病菌菌丝超微结构的影响  57-60
  4.4 讨论  60-62
第五章 结论  62-64
图版  64-66
参考文献  66-72
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  72-74
致谢  74-76
个人简历  76-77

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 菌类(食用菌)
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