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荧光光度法在生命科学研究中的应用

作 者: 王敬政
导 师: 江崇球
学 校: 山东师范大学
专 业: 分析化学
关键词: 荧光光度法 生命科学 研究中 分析化学 特效试剂 非辐射能量转移 生物大分子 荧光分析 共振能量转移 氟脲嘧啶类
分类号: O657.34
类 型: 硕士论文
年 份: 2000年
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内容摘要


分析化学的飞速发展使得分析化学突破了单一学科的领域,由分析化学变为分析科学,涵盖了化学与数学、物理学、计算机科学、生物学等一系列学科,发展成为一门多学科性的综合学科。 而分析化学的发展方向之一为提高分析方法的高灵敏度(达原子级、分子级水平),高选择性(主要针对于复杂体系);之二为大力向生命科学领域拓展发展空间。 本文亦主要以上两个方向为目标,结合荧光分析自身的特点,在特效荧光试剂的合成与应用及生物大分子(如蛋白质)和药物的相互作用这两方面展开了一系列的研究工作。 开发新的荧光特效试剂,研究新的、专一的分析方法是分析化学这门学科的基础工作之一。在特效试剂的合成和应用方面,近年来的研究主要是围绕着提高试剂和分析方法的灵敏度、选择性展开的。腙类试剂电子流动桥相连的二个芳香环相邻羟基有强的配位成键和位阻作用,与金属离子生成络合物后减少了苯环的自由转动,增加了分子的刚性和共平面效应,使络合物的荧光强度明显增加。本文合成了两种荧光新试剂邻羟基茶醛水杨酰腙和邻羟基萘醛缩—8—氨基喹啉。研究了它们各自的性质,建立了测定生命微量元素Al,Sr,Mo,Cr等的荧光分析方法。 由于合成的新荧光试剂各级离解常数相差很小,难以经典的分光光度法进行测定,本文提出了一种测定多元酸重叠光谱pKa的新方法。 本文主要讨论了非辐射能量转移共振能量转移,即FRET)理论在生物大分子与药物分子的相互作用方面的应用。以人血清蛋白和牛血清蛋白为研究主体,以降血压药多沙唑嗪、氟脲嘧啶类抗肿瘤药、中草药芦荟有效成分芦荟大黄素为研究客体,利用荧光共振技术(FRET)研究药物与生物大分子相互作用、推算出它们之间结合点位的距离、热力学函数(ΔG、ΔH、ΔS)、相互作用的类型。

全文目录


第一章 绪论  4-10
第二章 特效荧光试剂的合成与应用  10-70
  第一节 β-环糊精增敏邻羟基萘醛水杨酰腙-锶荧光反应及其应用研究  12-20
  第二节 β-环糊精增敏邻羟基萘醛水杨酰腙-铝高灵敏荧光反应及其应用  20-27
  第三节 邻羟基萘醛缩-8-氨基喹啉-钼高灵敏荧光反应及其应用  27-50
    附本节英文译件  36-50
  第四节 邻羟基萘醛缩-8-氨基喹啉-铬高灵敏荧光反应的研究及其应用  50-70
    附本节英文译件  57-70
第三章 重叠光谱多元有机酸的离解常数的测定  70-89
  第一节 方法原理  71-75
  第二节 水-乙醇介质中邻羟基萘醛水杨酰腙离解常数的测定  75-82
  第三节 水—乙醇介质中邻羟基萘醛缩—8—氨基喹啉离解常数的测定  82-89
    有机酸碱离解常数求取计算机程序  88-89
第四章 生物大分子与药物小分子相互作用的研究  89-120
  第一节 共振能量转移(FRET)理论简介  89-92
  第二节 多沙唑嗪与血清白蛋白的作用及共存离子对反应影响的研究  92-100
  第三节 荧光光度法测定药物多沙唑嗪  100-105
  第四节 氟脲嘧啶类抗肿瘤药物与血清蛋白相互作用的研究  105-111
  第五节 芦荟大黄素与血清白蛋白的作用的研究  111-120
结论  120-121
作者所发表的学术论文及参加的课题  121-122
英文摘要  122-123

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中图分类: > 数理科学和化学 > 化学 > 分析化学 > 仪器分析法(物理及物理化学分析法) > 光化学分析法(光谱分析法) > X射线荧光分析法
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