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大鼠自体外周血内皮前体细胞培养的实验研究

作　者: 国伟婷
导　师: 李自普
学　校: 青岛大学
专　业: 儿科学
关键词: 细胞培养外周血单个核细胞内皮前细胞
分类号: R541.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的探讨自大鼠外周血获取内皮前体细胞(endothelial progenitorcells EPCS)的方法,为干细胞移植治疗缺血性心肌损伤提供新的无创性的细胞来源。方法抽取经连续皮下注射大鼠粒细胞集落刺激因子(Rat GranulocyteColony Stimulating Factor rG-CSF)七天的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠外周血,应用聚蔗糖(Ficoll 400)密度梯度离心法分离提取大鼠外周血中的单个核细胞,然后以20%低糖IMDM、胎牛血清、马血清、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor bFGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)等混合而成的完全培养液,进行体外培养扩增,培养所得细胞经CD31、CD34、Flk-1和vW F免疫荧光染色并检测其结合UEA-1、摄取ac-LDL的能力。结果培养所得细胞经CD31、CD34、Flk-1和vW F免疫荧光染色,并测定其结合UEA-1、摄取ac-LDL的能力,皆为阳性,证实为内皮前体细胞(EPC)。结论从粒细胞动员后的大鼠外周血中获取单个核细胞,经体外培养诱导,成功获得内皮前体细胞(EPC),内皮前体细胞(EPC)有望成为移植治疗缺血性心肌损伤的新的无创性细胞来源。

大鼠自体外周血内皮前体细胞培养的实验研究

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