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SD大鼠背根神经节细胞新取材和培养方法
作 者: 华中科技大学
导 师: 康皓
学 校: 华中科技大学
专 业: 外科学
关键词: 背根神经结 细胞培养
分类号: R-332
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 10次
引 用: 0次
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内容摘要
【目的】:探讨有效摘取SD大鼠背根神经结(DRG)的方法,为实验取材奠定基础。方法①取材选择为三周SD大鼠,提取DRG神经元。用显微解剖获取足够数量的SD大鼠背根神经结,通过胰蛋白酶+Ⅳ型胶原酶消化②分离:PBS洗涤吸干液体,加入0.2%Ⅳ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶放入37℃温箱边消化边用眼科剪剪碎背根神经结重复数次,直到消化液变得粘稠后就可以用滴管吹打,吹打后就可以完全的把背根组织彻底的消化掉,加入含有血清的NBL培养基终止消化,用1000转离心,③原代培养将细胞悬液加入底面铺有L一多聚赖氨酸的培养皿(PP )中,放人37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中,让其自然贴壁。定期在倒置相差显微镜下观察。【结果】背根神经结细胞原代贴壁生长较慢,一个月以后才能长满瓶底生长二天后20倍光镜下背根神经结细胞。细胞成簇生长,向四周放射状排列,细胞核圆形透亮,细胞形态多边型,向四周伸出较长的触须,其他类型细胞基本上已经死掉而悬浮在培养基里。
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全文目录
中文摘要 6-7 Abstract 7-9 Introduction 9-12 Materials and methods 12-16 Results 16-17 Figures 17-22 Discussion 22-28 Conclusion 28-29 References 29-32 Review 32-38 References 35-38 Acknowledgements 38
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中图分类: > 医药、卫生 > 医学研究方法 > 实验医学、医学实验 > 医用实验动物学
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