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酶水解技术在桂花资源开发中的应用研究
作 者: 靳熙茜
导 师: 汪海波
学 校: 武汉工业学院
专 业: 食品科学与工程
关键词: 桂花 酶水解 桂花浸膏 总黄酮 抗氧化活性
分类号: TQ654
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
本研究以桂花为原料,尝试利用酶水解技术提高桂花香料的产品得率和产品品质,并利用提取香料后的桂花残渣为原料,制备总黄酮类天然抗氧化性成分,以达到充分利用现有桂花资源、提高加工企业综合经济效益和减少环境污染的多重目的。在比较三种不同的水解酶对桂花浸膏得率影响的基础之上,最终选择β-葡萄糖苷酶作为水解酶;通过单因素实验确定了喷洒β-葡萄糖苷酶水解制备桂花浸膏的最佳工艺条件:酶用量0.5g/15g干桂花原料,酶水解体系pH值为5,酶水解温度50℃,酶水解时间2h,提取时无水乙醚用量300mL,回流提取时间2h,提取温度40℃,此条件下桂花浸膏得率达到6.02%。与传统提取法相比,喷洒β-葡萄糖苷酶水解工艺能对桂花中的香味前驱体进行水解作用,释放出传统提取方法难以提取的香味物质,不仅使桂花浸膏产品的得率提高了50%以上(传统提取法提取的桂花浸膏得率为2.95%),浸膏产品中的净油含量、有效挥发性成分的含量也均得到了显著提高,达到了预期的实验目的。以提取桂花香料后的桂花残渣为原料,分别通过常规乙醇浸提法和超声波辅助提取法提取残渣中具有天然抗氧化活性的总黄酮类物质,以提高桂花资源的利用效率。通过单因素实验和正交试验确定了常规乙醇浸提法和超声波辅助提取法的最佳提取工艺条件:50%乙醇浓度,料液比1:80,浸提时间2h,浸提温度60℃;超声功率60W,超声提取温度50℃,料液比1:80,超声提取时间30min。与常规乙醇浸提法相比,超声波辅助提取工艺具有提取率更高、工艺过程更快速简单、生产能耗更低等显著优点,是一种理想的提取方法。通过还原能力的测定、清除DPPH能力的测定和抑制亚油酸氧化能力的测定等实验,系统分析了桂花总黄酮类粗提物的体外抗氧化活性。结果表明,桂花总黄酮类粗提物有较好的体外抗氧化活性,且其体外抗氧化活性接近于Vc的体外抗氧化活性,特别是抑制亚油酸的氧化能力还远强于Vc。所以提取桂花香料后的桂花残渣在天然抗氧化剂领域中具备潜在的开发价值。在以上研究基础之上,进一步对桂花总黄酮粗提物进行了分级并首次对桂花黄酮中的主要抗氧化性成分进行初步的结构鉴定。采用硅胶柱层析分离方法,获得3个级分,分别测定其抗氧化性能后发现,级份1和级分3具有较好的抗氧化活性。LC–DAD–ESI/MS分析结果表明,级份1中以黄酮甙类成分为主,而级份3中的物质可能多为双黄酮类成分。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-11 第一章 绪论 11-21 1 桂花资源 11-12 1.1 桂花的产地和种类 11 1.2 桂花的主要化学成分 11-12 1.3 桂花的开发利用价值 12 2 天然香料的研究进展 12-15 2.1 天然香料的简介 12-13 2.2 国内外香料香精工业发展的现状 13 2.3 植物性天然香料的化学组成、提取和分析方法 13-14 2.4 桂花香料的研究现状 14-15 3 黄酮类化合物的研究进展 15-19 3.1 黄酮类化合物的概述 15 3.2 黄酮类化合物的结构和分类 15-16 3.3 黄酮类化合物的理化性质和生理功能 16-17 3.4 黄酮类化合物的提取、纯化及结构鉴定 17-18 3.5 黄酮类化合物抗氧化性能的常用评价方法 18-19 3.5.1 还原能力 18 3.5.2 清除DPPH 自由基的能力 18 3.5.3 抑制亚油酸氧化能力(硫氰酸铁法-FTC) 18 3.5.4 总抗氧化能力 18-19 4 立题背景意义 19-20 5 主要研究内容 20-21 5.1 总体研究思路 20 5.2 主要研究内容 20-21 5.2.1 酶水解制备桂花香料的新工艺研究 20 5.2.2 桂花残渣中黄酮类抗氧化性成分的提取与性能研究 20-21 第2章 酶水解制备桂花香料的新工艺研究 21-38 1 材料与方法 21-26 1.1 试剂与仪器 21-23 1.1.1 实验原料 21-22 1.1.2 主要试剂 22 1.1.3 主要仪器 22-23 1.2 实验方法 23-26 1.2.1 桂花浸膏的制备工艺路线 23-24 1.2.2 桂花浸膏提取溶剂种类的选择 24 1.2.3 酶水解对桂花浸膏提取效果的影响及酶水解方法的选择 24 1.2.4 水解酶种类的选择 24 1.2.5 喷洒单一酶水解提取工艺条件的优化研究 24-25 1.2.6 酶的复配研究 25 1.2.7 桂花浸膏产品的品质评价 25-26 2 结果与分析 26-36 2.1 桂花浸膏提取溶剂种类的选择 26 2.2 酶水解对桂花浸膏提取效果的影响及酶水解方法的选择 26-27 2.3 水解酶种类的选择 27-28 2.4 喷洒β-葡萄糖苷酶水解提取工艺条件的优化研究 28-30 2.4.1 酶用量的影响 28 2.4.2 酶水解时间的影响 28-29 2.4.3 酶水解温度的影响 29 2.4.4 酶水解体系pH 值的影响 29-30 2.5 酶的复配研究 30 2.6 桂花浸膏产品的品质评价 30-36 2.6.1 桂花浸膏产品和桂花残渣的感官评价 30-32 2.6.2 桂花浸膏产品中净油含量的测定和感官评价 32 2.6.3 桂花浸膏产品中挥发性成分的鉴定与比较 32-36 3 小结 36-38 第3章 桂花残渣中黄酮类抗氧化性成分的提取与性能研究 38-66 1 材料与方法 38-44 1.1 试剂与仪器 38-39 1.1.1 实验原料 38 1.1.2 主要试剂 38-39 1.1.3 主要仪器 39 1.2 实验方法 39-44 1.2.1 总黄酮含量的定量测定方法 39-40 1.2.2 不同桂花原料中总黄酮含量的测定 40 1.2.3 总黄酮类抗氧化性成分提取工艺及参数优化 40-41 1.2.4 总黄酮类粗提物的理化性质分析 41-42 1.2.5 总黄酮类粗提物的体外抗氧化活性测定 42-43 1.2.6 总黄酮粗提物的分级和主要级份的结构鉴定 43-44 2 结果与分析 44-64 2.1 不同桂花原料中总黄酮含量的测定 44-45 2.2 总黄酮类抗氧化性成分提取工艺及参数优化 45-52 2.2.1 单因素实验 45-48 2.2.2 正交试验 48-49 2.2.3 超声波辅助提取法对总黄酮提取效果的影响 49-51 2.2.4 超声波辅助提取总黄酮工艺的正交试验 51-52 2.2.5 两种提取法对桂花残渣中的总黄酮得率的比较 52 2.3 总黄酮类粗提物的理化性质分析 52-55 2.3.1 溶解性分析 52 2.3.2 稳定性分析 52-53 2.3.3 紫外吸收光谱分析 53-54 2.3.4 红外光谱分析 54-55 2.4 总黄酮类粗提物的体外抗氧化活性测定 55-58 2.4.1 还原能力 55 2.4.2 消除DPPH 自由基的能力 55-56 2.4.3 抑制亚油酸的氧化能力 56 2.4.4 总抗氧化能力 56-57 2.4.5 酶水解处理对桂花总黄酮体外抗氧化活性的影响 57-58 2.5 总黄酮粗提物的分级和主要级份的结构鉴定 58-64 2.5.1 各级份物质的特征性状 58-59 2.5.2 各级份物质的体外抗氧化性比较 59-60 2.5.3 主要抗氧化性成分组成的初步鉴定 60-64 3 小结 64-66 第4章 结论 66-67 参考文献 67-72 致谢 72-73 附录 A 73-82 攻读学位期间的研究成果 82
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 香料及化妆品工业 > 天然香料
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