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从肝癌和胃癌组织中分离的螺杆菌耐药性研究

作　者: 张志锋
导　师: 强新
学　校: 青岛大学
专　业: 病原生物学
关键词: 原发肝癌螺杆菌 16SrRNA Southern杂交序列测定药敏试验
分类号: R735
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的从原发性肝癌(PLC)和胃癌组织中分离螺杆菌,经鉴定后进行药敏和耐药性试验,为临床防治Hp感染提供有价值的参考资料。方法1、选取28例PLC患者的肝癌组织和25例胃癌患者胃癌组织为实验组,22例其他肝病患者肝组织和36其它胃病组织为对照组。应用哥伦比亚培养基分离培养癌组织中的螺杆菌,并对培养阳性标本进行染色、电镜观察和尿素酶检测鉴定,采用聚合酶链反应(PCR)检测螺杆菌属16SrRNA基因作为初步鉴定。2、组织和细菌的16SrRNA的扩增产物经Southern杂交和测序同源性比较作为确认。3、琼脂稀释和E-test试验进行药敏及耐药检测。结果1、共分离培养出21株螺杆菌,其中肝癌组织中3株,分离阳性率10.7%;胃癌组织中6株,分离阳性率24%;其它胃病组织中12株,分离阳性率77.3%。2、28例原发性肝癌标本中有17例检出螺杆菌属16SrRNA基因,阳性率为60.7%;25例胃癌标本有18例检出螺杆菌16SrRNA,阳性率为72%。其它胃病标本有28例阳性,阳性率77.8%。统计学处理显示,肝癌和胃癌两组间阳性率差异无显著(P值＞0.05),胃癌组与其它胃病组间也无显著差异(P＞0.05),但肝癌组与其它肝病组间有显著性差异(P＜0.01)。经革兰染色、电镜、尿素酶、16SrRNA基因检测和序列测定结果证实为Hp。序列测定表明,组织中分离的螺杆菌16SrRNA序列与Hp有97.80%的同源性。3、21株HP对甲硝唑耐药率为61.9%,对阿莫西林耐药率为19.0%;对克拉霉素的耐药率为4.76%;对四环素为0;为临床Hp感染的治疗提供了参考。结论1、青岛地区从肝癌和胃癌分离的HP对甲硝唑耐药性最高,为61.9%,对阿莫西林耐药性为19.0%;对克拉霉素的耐药性为4.76%;对四环素为0。表明Hp对四环素最敏感,对甲硝唑最不敏感。2、对Hp常用抗生素药敏试验的结果与国内其它实验室结果基本相符。。3、16SrRNA基因检测和序列测定结果表明,PLC和胃癌组织中存在Hp感染且感染率较高。提示感染与PLC和胃癌可能存在某些相关性。

全文目录

摘要  2-4
Abstract  4-7
引言  7-8
第一章实验材料  8-9
  1 主要试剂  8
  2 主要仪器设备  8-9
第二章实验方法  9-15
  1 实验分组、标本采集与处理  9
  2 螺杆菌培养  9-10
  3 透射电镜观察细菌形态  10
  4 提取组织和细菌DNA  10-11
  5 螺杆菌属16SrRNA PCR扩增  11
  6 Southern杂交和DNA序列分析  11-12
  7 药敏试验  12-14
  8 实验结果的统计学处理  14-15
第三章实验结果  15-18
  1 细菌培养结果  15
  2 16SrRNA PCR扩增药敏结果  15-16
  3 Southern杂交结果  16
  4 DNA序列测定与比对结果  16
  5 药敏结果  16-18
第四章附图  18-23
第五章讨论  23-26
第六章结论  26-27
参考文献  27-29
综述  29-44
在学期间的研究成果及发表的论文  44-45
致谢  45-46

从肝癌和胃癌组织中分离的螺杆菌耐药性研究

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