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烧伤(burns)是在生产生活中经常发生的一种皮肤损伤,不同程度的烧伤对机体的影响也不尽相同。而烧伤后所引发的全身性严重疾病,不仅治疗难度比较大,治疗时间长外,也是造成病人死亡的主要因素。因此找到一种有效并且价格低廉的治疗药物是迫在眉睫的任务。烧伤后创面愈合是一个复杂的过程,其中有大量的生长因子参与,这些生长因子的调控作用对于创面的愈合将会产生重要的影响。目前,一些研究表明,在烧伤初期,创面中c-fos、c-myc和bFGF的mRNA均呈现升高趋势。虽然在定位上,烫伤后创面皮肤组织3种生长相关因子的蛋白表达与其mRNA表达的变化规律不尽相同,但在时相上的变化趋势却有一致性。[1]另有实验表明,在烧伤初期PDGF、PDGFR和EGFR基因表达明显增强。也有一些文献介绍,在烧伤创面上给予外源性的生长因子,对其创面的愈合有显著的改善,能在很大程度上缩短愈合时间,改进愈合效果。[2]目前,在临床上治疗烧伤的药物有很多,其中肝素是近些年临床与动物实验研究比较多的一种药物。大多数文献从各个方面研究了肝素治疗烧伤的机理,主要是从缓解机体的状态,减轻创面感染,防止内部脏器的并发症发生等方面进行了探讨。那么对于采用肝素治疗的患者,创面的生长因子发生了什么变化?是升高,还是降低?迄今为止,并没有明确的探讨。为了揭示肝素对烧伤早期创面生长因子的影响作用,本论文试图利用分子生物学的方法,找到创面生长因子的变化规律,为肝素治疗烧伤提供一定的理论依据。目的:揭示在应用肝素治疗烧伤时,早期创面生长因子的变化。分析比较用肝素治疗与未用肝素治疗的烧伤小鼠皮肤组织中蛋白质的差异,并且选取一种生长因子,进行量化分析。方法:利用蛋白质组学的方法,分别取给药(肝素)与自然愈合的烧伤小鼠烧伤区域皮肤组织蛋白,进行双向电泳检测,通过PDQuest软件分析对比皮肤组织蛋白中的差异;并选取PDGF 受体(PDGFR? ),进行Western-Blot,对不同蛋白样品进行量化分析。结果:(1)载体两性电解质等点聚焦双向电泳,观察经过肝素处理与未经肝素处理的创面蛋白变化情况,发现在早期创面中,蛋白质数量增加明显,经过对比,空白组、对照组与实验组中存在显著性差异。(2)通过Western-Blot技术,显示PDGFR-β在伤后的表达明显增强,而对照组与给药组也存在明显差异。结论:在用肝素治疗烧伤小鼠的过程中,治疗组的小鼠恢复情况要明显好于对照组,而肝素对于创面的愈合有显著疗效,通过分子生物学技术,在蛋白质表达水平上,表明肝素对于创面的一些生长因子的表达有明显促进作用。该结果提示,肝素对于烧伤的治疗作用,是一种多层次,多方面的过程。
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