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沙利度胺联合三氧化二砷对急性髓系白血病细胞表达VEGF和P-gp的影响
作 者: 郑红艳
导 师: 李慧慧
学 校: 南昌大学
专 业: 内科
关键词: VEGF P-gP 沙利度胺 As2O3
分类号: R733.71
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
目的:观察沙利度胺(TLD)和三氧化二砷(As2O3 )对急性髓系白血病(AML)细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)和表达P-糖蛋白(P-gP)的影响。方法:收集AML患者和健康体检者的血液,肝素抗凝并离心后,吸取上层血浆置-20℃冰箱内冷冻保存。收集AML患者的骨髓液,用Ficoll淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞(BMMNC)。37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养细胞于RPMI l64O培养液中。HL-60/VCR细胞株的培养基中加入VCR以维持耐药性。TLD和As2O3以不同浓度加入培养体系中,同时设空白对照。用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)法检测血浆和细胞培养上清液中VEGF的浓度,用流式细胞术(FCM)检测细胞膜上MDR1/p-gp的表达率。结果:(1)AML患者血浆中VEGF浓度明显高于正常对照组(P<0.01)。(2)加入TLD和As2O3后,AML细胞和HL-60/VCR细胞株培养上清中VEGF浓度明显降低。(3)加入TLD和As2O3前后,AML细胞和HL-60/VCR细胞株的细胞膜上P-gP的表达率未见明显改变。(4)加入TLD和As2O3前后,AML细胞培养上清中VEGF的升高和细胞膜表面PgP的表达具有一定的正相关性。结论:(1)白血病细胞可以通过自分泌途径分泌VEGF。(2)TLD和AS2O3均可抑制HL-60/VCR和AML细胞分泌VEGF。(3)TLD和AS2O3均未能影响HL-60/VCR和AML细胞膜上P-gP的表达。(4)AML患者BMMNC培养上清中VEGF的升高和细胞膜表面PgP的表达具有一定的正相关性,二者联合检测可作为监测病情和判断预后的指标。
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全文目录
摘要 3-4 ABSTRACT 4-9 第1章 引言 9-11 第2章 材料与方法 11-16 2.1 材料 11-13 2.1.1 细胞种类和来源 11 2.1.2 血液来源 11 2.1.3 主要试剂 11 2.1.4 主要实验仪器 11-12 2.1.5 溶液配制 12-13 2.2 实验方法 13-16 2.2.1 HL-60/VCR 细胞的培养与传代 13 2.2.2 临床血液标本采集与处理 13 2.2.3 临床骨髓液标本采集与处理 13-14 2.2.4 HL-60/VCR 细胞和 BMMNC 分组培养并留取上清液以备检测VEGF 含量 14 2.2.5 流式细胞术检测MDR1/p-gp的表达率 14-15 2.2.6 ELISA 法定量检测血浆和细胞培养上清液中VEGF 含量 15 2.2.7 统计学分析 15-16 第3章 结果 16-21 3.1 血浆中VEGF 的含量 16 3.2 HL-60/VCR细胞培养上清液中VEGF的含量 16-17 3.3 BMMNC 培养上清液中VEGF 的含量 17-18 3.4 HL-60/VCR细胞膜表面PgP的表达率 18 3.5 BMMNC 细胞膜表面PgP 的表达率 18-19 3.6 非CR 患者PgP 表达率与VEGF 含量的相关性 19-21 第4章 讨论 21-26 4.1 白血病细胞的VEGF 自分泌途径 21-22 4.2 沙利度胺和三氧化二砷对白血病细胞分泌VEGF 的调节 22-23 4.3 沙利度胺和三氧化二砷对白血病细胞膜上PgP 表达率的影响 23-24 4.4 PgP表达率和VEGF含量对AML患者的预后监测 24-26 第5章 结论与展望 26-27 5.1 结论 26 5.2 进一步工作的方向 26-27 第6章 致谢 27-28 参考文献 28-31 附录 综述 31-40 攻读学位期间的研究成果 40
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病 > 急性白血病
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