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As_2O_3下调MG-63骨肉瘤细胞IEX-1基因表达的转录调控机制研究
作 者: 朱武
导 师: 肖涛
学 校: 中南大学
专 业: 外科学
关键词: As2O3 IEX-1 骨肉瘤 p53 转录调控
分类号: R738.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 23次
引 用: 0次
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内容摘要
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目的As2O3是中国传统中药砒霜的主要有效成分,最早应用于血液系统肿瘤的治疗,随后研究表明其对实体瘤也具有抑制细胞增殖并诱导凋亡的作用。本研究小组早期研究发现,1.0μmol/L的As2O3可以体外诱导骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡,进一步的cDNA Array,RT-PCR,Northern Blot证实细胞凋亡与As2O3干预后IEX-1基因表达下调有关。本研究拟深入探讨As2O3干预MG-63细胞下调IEX-1基因表达转录调控机制。方法采用PCR方法从外周血gDNA中扩增出IEX-1基因的启动子及调控序列,连入萤光素酶报告基因载体,通过双萤光素酶分析As2O3干预对IEX-1基因启动子转录活性的影响;[γ-32P]ATP末端标记EMSA分析IEX-1启动子顺式作用元件与p53结合;Western Blot检测As2O3干预后p53及IEX-1蛋白表达水平的改变。结果发现As2O3干预骨肉瘤细胞系MG-63后能诱导p53蛋白表达上调,增加的p53蛋白通过与IEX-1的启动子结合,转录抑制IEX-1的转录,导致IEX-1基因表达下调。结论本研究进一步证实了IEX-1与骨肉瘤的重要关系,同时也阐明As2O3诱导IEX-1基因表达下调的转录调控机制。
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全文目录
一、中文摘要 5-6
二、英文摘要 6-9
三、英文缩略词表 9-10
四、论文正文 10-39
前言 10-12
第一章 As_2O_3干预对IEX-1基因启动子活性的影响 12-26
1. 材料与试剂 12-14
2. 实验方法 14-21
3. 结果 21-23
4. 分析与讨论 23-25
5. 结论 25-26
第二章 As_2O_3下调MG-63骨肉瘤细胞IEX-1基因表达的转录调控机制研究 26-39
1. 材料与试剂 26-30
2. 实验方法 30-35
3. 实验结果 35-37
4. 分析与讨论 37-38
5. 结论 38-39
五、参考文献 39-42
六、综述 42-52
七、致谢 52-53
八、攻读学位期间主要的研究成果 53
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 运动系肿瘤 > 骨骼肿瘤
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