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目的研究射频消融(radiofrequency ablation ,RFA),高频热疗(High- frequency hyperthermia ,HFH)二者联合对兔肝VX2肿瘤侵袭能力的改变,并评价其有效性、安全性、实用性。方法:建立成功兔肝VX2肿瘤模型32只,随机分为A,B,C,D四组,每组8只。A组为空白组,不进行任何治疗干预;B组为RFA治疗组,即实验开始第1天行RFA治疗;C组为HFH治疗组,即实验开始第1、4、7天分别行一次HFH治疗;D组为RFA+HFH联合治疗组,,实验开始第1天行RFA治疗,并且在第1、4、7天分别行一次HFH治疗。。各组于治疗前1天、治疗后第1、4、7、14天抽血检测ALT和AST,评价治疗的安全性。治疗前1天和治疗2周时用超声测量全部实验动物的肿瘤最长径、最短径以计算肿瘤体积、肿瘤生长率,以了解肿瘤的生长情况;治疗后14天处死时详细记录肝内转移及肺、淋巴结转移情况;HE染色观察病理学改变;通过免疫组化法检测肿瘤中心组织、肿瘤边缘组织、和正常肝组织的基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)和血管内皮因子CD34,以了解肿瘤浸润转移能力和新生血管的情况。结果:1.ALT、AST检查结果各组动物的ALT、AST在治疗前1天无显著性差异P>0.05。各治疗组ALT、AST在治疗后第1天均显著上升P<0.01,冷极射频组、联合治疗组组转氨酶升高幅度最大,各治疗组第4天开始下降,第14天冷极射频组、高频热疗组下降至术前水平,联合治疗组仍比术前水平高。2.各组之间肿瘤体积在治疗前无显著性差异(P﹥0.05);治疗后对照组肿瘤生长率为+(28.84±14.13)%,显著高于各治疗组(P﹤0.01);RFA+HFH联合组组治疗后肿瘤生长率为-(155.65±52.17)%,较单独治疗的肿瘤生长率降低,有显著性差异(P﹤0.05)。3.脏器转移以肺转移为主,联合组的转移率为37.5%,冷极射频组的转移率62.5%,体外高频热疗组的转移率50.0%,与实验对照组的转移率87.5%比较,差异均具有显著性(P<0.05)。联合组的转移率与冷极射频组和体外高频热疗组比较,均有显著性差异(P<0.05)。4.病理形态观察:镜下可见明显肿瘤细胞增生,细胞核大、深染,异常分裂像多见,周围组织未见增生的胶原纤维;RFA组及RFA+HFH组的病灶中心组织均呈凝固性坏死,中心区外可见大量增生的胶原纤维,外周有炎性反应带,RFA组组治疗灶周边偶可见残存的肿瘤细胞,但RFA组的坏死及损伤面积比联合组小;HFH组的无凝固性坏死,但瘤体及周围呈广泛炎性反应.5. MMP-2、MMP-9、CD34阳性表达:总灰度参数(总灰度/扫描面积)肿瘤中心组织中,各指标阳性表达率在对照组最高,在RFA组及联合组最低,所有治疗组各指标阳性表达率与对照组组间比较有明显差异(P<0.05)。肿瘤边缘组织中,各指标阳性表达率在对照组最高,所有治疗组各指标阳性表达率与对照组组间比较有显著差异(P<0.05),各指标阳性表达率在联合组最低,联合组与RFA组和HFH组比较有明显差异(P<0.05)。正常肝组织中,各指标阳性表达率在对照组最高,所有治疗组各指标阳性表达率与对照组组间比较有显著差异(P<0.05),各指标阳性表达率在联合组最低,联合组与RFA组和HFH组比较有明显差异(P<0.05)。结论:冷极射频联合高频热疗治疗兔肝VX2肿瘤对肝功能仅有暂时的影响,治疗是安全的。本实验采取了冷极射频的优点,即在较高的高温下使肿瘤产生凝固性坏死,较彻底地灭活了治疗区域的肿瘤细胞,同时也结合了高频热疗的优点,即较低的高温更能激活机体免疫力。冷极射频联合高频热疗更能明显抑制肿瘤体积的增长;减少肿瘤转移的效果更明显;更能降低基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9和血管内皮因子CD34的表达,从而使肿瘤侵袭力降低。这是一种较有效的治疗肝肿瘤的方法,比单纯治疗的效果理想,有一定的临床应用价值。本实验也为多种热疗联合治疗肝癌提供了理论依据。
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