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肾透明细胞癌多中心病灶单克隆、多克隆起源并存的研究论证

作　者: 王增增
导　师: 李泉林
学　校: 大连医科大学
专　业: 泌尿外科学
关键词: 肾癌多中心灶 LOH 克隆起源
分类号: R737.11
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 17次
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内容摘要

目的：随着腹部影像学诊断技术的进步和广泛应用,早期肾癌的诊断率不断提高,且初发诊断病例肿瘤的直径亦有所减小,使得保留肾单位手术(nephron sparing surgery, NSS)日益受到重视。尤其对于初发肿瘤较小(肿瘤≤4cm)的患者,NSS在最大限度的保留功能肾单位的同时,亦取得了良好的临床效果,由此NSS更是在国内外得到广泛开展。而其中肾癌多中心病灶是造成保肾手术后局部复发的主要因素之一。临床研究报道肾癌多中心病灶的发生率为5%-25%,且多为镜下多中心灶,基于现有的检测技术,术前多中心病灶的低检出性更是增加了人们对NSS的质疑。目前关于散发性肾透明细胞癌多中心病灶的生物学行为、潜在恶性及发生机制等尚不清楚。本研究通过分子生物学技术研究多中心灶肾透明细胞癌各癌灶间的克隆起源关系。材料与方法：本研究中,提取来自20例多中心灶性肾透明细胞癌患者的共计42枚癌灶(均已经病理学家诊断为肾透明细胞癌)及对应的正常组织的DNA后,选取3、7、8、9、17号染色体上10个微卫星多态性标志物D3S1038、D3S1234、D3S1300、D3S1317、D3S1540、D3S1597、D7S522、D8S261、D9S171、TP53作为引物分别对20例多中心灶性肾透明细胞癌组织及其对应的正常肾组织DNA进行PCR扩增。在完成对PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化乙锭染色之后,在紫外透射光下观察照相并用Labworks3.0凝胶分析软件进行分析。在某位点的信息性病例中若肿瘤组织的某一条等位基因条带消失或相对密度减少50%,则记录为杂合性缺失(LOH)。实验重复两次,两次结果一致者纳入最终LOH检测结果。观察各癌灶基因组DNA的LOH类型。若多中心病灶与原发灶显示相同的等位基因图谱表示为共同克隆来源,否则为独立克隆起源。结果：在20例多中心灶性肾透明细胞癌中,17例(85%)在上述10位点中的至少1个位点检测到LOH。其中14例(14/17)检测到原发灶与相应的多中心灶有相同的LOH类型。在该14例中,有3例仅多中心癌灶在某1个位点检测到LOH；有另外2例仅原发癌灶在某1位点检测到LOH。有3例(3/17)检测到原发灶与相应并发癌灶有不相同的LOH类型。结论：我们的实验研究结果表明似乎大多数多中心灶性肾透明细胞癌为同一克隆起源,即由原发癌灶肾内转移而来；但是我们也发现了多克隆起源的证据。结合以往国内外相关研究,我们认为多中心灶性肾透明细胞癌同时存在单克隆起源和多克隆起源两种发生机制。

全文目录

一、摘要  5-9
  (一) 中文摘要  5-7
  (二) 英文摘要  7-9
二、文献综述  9-21
  (一) 综述  9-16
  (二) 参考文献  16-21
三、正文  21-40
  (一) 前言  21-22
  (二) 材料与方法  22-25
  (三) 结果  25-28
  (四) 讨论  28-32
  (五) 结论  32-35
  (六) 参考文献  35-40
四、致谢  40-41

肾透明细胞癌多中心病灶单克隆、多克隆起源并存的研究论证

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