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大鼠急性高眼压后视网膜p-STAT3和MMP-9的表达及意义

作　者: 杨乐
导　师: 申家泉
学　校: 山东大学
专　业: 眼科学
关键词: 视网膜 急性高眼压 缺血—再灌注损伤 信号转导子与转录激活子3 基质金属蛋白酶9 免疫组化
分类号: R775
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的检测急性高眼压后,大鼠视网膜内磷酸化信号转导子与转录激活子3（phosphorylation signal transduction and activators of transcription-3,p-STAT3）蛋白和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的动态变化。探讨p-STAT3和MMP-9与视网膜节细胞凋亡的关系。方法正常成年SD大鼠35只（山东大学动物实验中心提供）,体重（200±25）g,雌雄不限。随机分成5组,分别为高眼压后6h、12h、24h、48h和72h组,每组7只,任选一眼为手术眼,另一眼为自身对照组。1%异戊巴比妥钠30mg.kg-1腹腔注射全麻,利用前房高压灌注法造成大鼠视网膜缺血60min,解除高眼压,建立急性高眼压缺血再灌注模型,并于急性高眼压后6h、12h、24h、48h和72h 4%多聚甲醛大鼠心脏灌注固定,摘取眼球。4%多聚甲醛固定液固定24h,制备石蜡眼球标本。采用免疫组化SP法检测大鼠视网膜内p-STAT3和MMP-9蛋白表达。一抗为兔抗鼠p-STAT3单克隆抗体（Cell Signal,1:200）和兔抗鼠MMP-9多克隆抗体（武汉博士德生物工程有限公司,1:200）,二抗山羊抗兔IgG,0.05%二氨基联苯胺盐酸盐（diaminobenzidine,DAB）显色试剂显色。经p-STAT3、MMP-9免疫组织化学染色的视网膜切片,用LEICA IM 50型全自动医学图像分析系统测量其平均光密度值。数据资料以均数±标准差表示,结果以SPSS统计软件进行方差分析t检验。以P＜0.05为有统计学差异。结果1.正常视网膜p-STAT3和MMP-9呈弱阳性表达。2.p-STAT3阳性染色表达于急性高眼压6h出现,12h达高峰,24h后表达含量逐渐下降,72h接近正常。阳性表达主要位于视网膜内核层和节细胞胞核。3.MMP-9阳性染色表达于急性高眼压6h出现,24h达高峰,48h后表达含量逐渐下降,72h接近正常。阳性表达主要位于神经节细胞胞浆和内丛状层。结论1.本实验证明在急性高眼压损伤过程p-STAT3,MMP-9均发生了表达变化,二者共同参与急性高眼压视网膜缺血再灌注的病理改变。2.JAK-STAT信号通路参与急性高眼压损伤过程3.p-STAT3和MMP-9和视网膜节细胞凋亡有关,共同参与凋亡过程。

全文目录


中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
符号说明  10-12
前言  12-14
材料与方法  14-19
结果  19-20
讨论  20-26
结论  26-27
附表  27-33
参考文献  33-38
文献综述  38-48
致谢  48-49
攻读硕士学位期间发表的论文  49-50
学位论文评阅及答辩情况表  50

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 眼压与青光眼
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