学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
采用转基因小鼠初步探讨核仁素的心肌保护作用
作 者: 周斌
导 师: 肖献忠
学 校: 中南大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 核仁素 转基因小鼠 心肌缺血-再灌注损伤
分类号: R363
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 22次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
[目的]构建在心肌中特异性表达外源性核仁素的转基因小鼠,研究核仁素在整体动物水平能否发挥心肌保护作用。[方法]①利用基因重组技术构建小鼠核仁素基因表达质粒(pcDNA3.1-Ncl),转染至H9C2细胞后,采用RT-PCR和Western-blot方法检测小鼠核仁素基因在真核细胞中的表达能力;②将具有表达能力的小鼠核仁素基因序列通过基因重组方法构建心肌特异表达外源性核仁素蛋白的表达质粒(Alpha-MyHc clone 26-Ncl),经酶切、测序验证其准确性;③制备心肌细胞内特异性表达外源性核仁素的转基因小鼠,采用PCR技术鉴定转基因小鼠基因型。采用real-time PCR方法检测转基因小鼠心肌中核仁素基因的相对含量;采用Western-blot方法检测转基因小鼠心肌组织及其他组织中核仁素蛋白的表达。④采用组织切片及HE染色法观察转基因小鼠心肌组织形态;测量心脏重量、体重、心脏重量指数;测量左室压最大上升速率(+LV Max dP/dt),观察核仁素在心肌组织高表达后对小鼠心脏形态功能是否有影响。⑤应用转基因小鼠制备心肌缺血-再灌注损伤模型,检测心肌caspase-3活性、血清肌酸激酶活性和左室压最大上升速率(+LV Max dP/dt)变化,研究核仁素对心肌缺血-再灌注损伤的影响。[结果]①成功构建核仁素真核表达质粒(pcDNA3.1-Ncl)和小鼠核仁素基因的心肌特异性表达载体(Alpha-MyHc clone 26-Ncl),制备了核仁素在心肌组织内特异性高表达的转基因小鼠。②转基因小鼠心肌组织形态、心脏重量、体重、心脏重量指数,以及正常时左室压最大上升速率(+LV Max dP/dt)与野生型小鼠相比无明显差异。③与野生型小鼠相比,核仁素转基因小鼠心肌缺血-再灌注损伤后心肌caspase-3活性降低,血清肌酸激酶活性降低,左室压最大上升速率(+LV Max dP/dt)升高。[结论]核仁素在整体动物水平能减轻心肌缺血-再灌注损伤。
|
全文目录
摘要 4-6 ABSTRACT 6-10 第一章 前言 10-13 第二章 材料与方法 13-26 2.1 材料 13-14 2.2 方法 14-26 第三章 结果 26-41 3.1 心肌特异性高表达核仁素Alpha-MyHc clone 26-Ncl质粒的构建 26-30 3.2 心肌特异性高表达核仁素转基因小鼠的建立与鉴定 30-36 3.3 心肌特异性高表达核仁素对小鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用 36-41 第四章 讨论 41-43 第五章 结论 43-44 参考文献 44-47 综述 47-55 参考文献 52-55 攻读硕士学位期间主要成绩 55-56 致谢 56
|
相似论文
- 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
- CMT2L型转基因小鼠的基因鉴定与行为学分析,R746
- 针对HLA-A2转基因小鼠皮肤移植物的排斥反应更接近急性排斥反应,R392
- 4.1蛋白家族在不同来源小鼠脑源性NSCs及其分化细胞中的表达,Q26
- 三羟异黄酮对孕期乳腺癌(MMTV)-ErbB-2转基因小鼠P53表达变化的研究,R737.9
- APP转基因小鼠脑组织中4.1蛋白的表达及意义,R749.161
- 嗅鞘细胞表型特性和对mSOD1~(G93A)ALS大鼠的治疗研究,R744
- β-半乳糖苷酶在ROSAβgeo26小鼠的脑和神经干细胞中的表达,R329
- 转基因阿尔茨海默病小鼠脑内炎症反应的诱发因素及其与认知功能障碍关系的研究,R749.16
- B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠HBsAg免疫效果影响的初步研究,R512.62
- 调控表达HCVNS5B蛋白小鼠模型的建立,R-332
- 非编码基因Z38荷瘤裸鼠的研究及转基因小鼠的构建和鉴定,Q78
- Cripto-1瘤基因高表达在肝癌发病机理中的作用及其临床意义,R735.7
- Tiam1在结直肠癌发生发展中的体内功能研究,R735.3
- 福寿螺多糖的提取及抗乙肝病毒实验研究,R285
- 中药复方有效组分早期干预对APP转基因小鼠胆碱能系统及脑细胞凋亡的影响,R285
- 中药复方有效组分对APP转基因小鼠学习记忆的影响及其作用机理研究,R285.5
- Plcd1转基因小鼠的建立,Q78
- Bcr启动子驱动EGFP表达转基因小鼠的制备和初步鉴定,Q78
- Vill转基因小鼠的制备,Q78
中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
© 2012 www.xueweilunwen.com
|