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内皮祖细胞移植治疗慢性深静脉血栓的实验研究

作　者: 姜坤
导　师: 李晓强
学　校: 苏州大学
专　业: 普通外科学
关键词: 内皮祖细胞干细胞移植新生血管化病理性深静脉血栓形成
分类号: R543
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),探讨其生物学特性,观察EPCs移植对慢性深静脉血栓的治疗作用,为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。方法:1.密度梯度离心法获取Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells,BMMNCs),内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为EPCs并进行鉴定。MTT比色法观察其增殖能力。2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型,并饲养10 d以上。动物随机分三组,经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A组(n=25):EPCs移植组,移植1ml含有106个EPCs的细胞悬液;B组(n=25):EGM-2MV对照组,移植1ml培养基;C组(n=25):空白对照组,建立血栓模型后不做其他处理。3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓,应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot测定第14天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。4.采用SPSS13.0软件进行分析。结果:体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性EPCs,下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型;vWF免疫组化显示A组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C组,B、C组之间差异无统计学意义;Western blot结果显示A、B、C三组VEGF、bFGF蛋白均有表达,A组较B、C组明显上调(P<0.05),B组和C组之间差异无统计学意义。结论: EPCs移植后分化为内皮细胞,使血栓内血管的新生能力明显增强,加快血栓的机化和再通。

全文目录

中文摘要  3-4
Abstract  4-7
引言  7-9
第一部分：大鼠骨髓源性内皮祖细胞的分离培养和鉴定  9-17
  材料与方法  9-12
  结果  12-14
  附图  14-17
第二部分：EPCs 移植治疗慢性深静脉血栓的实验研究  17-32
  材料和方法  17-26
  结果  26-28
  附图  28-32
讨论  32-37
结论  37-38
参考文献  38-43
综述：内皮祖细胞的生物学特性及在治疗下肢深静脉血栓形成中的应用  43-51
  参考文献  48-51
攻读学位期间公开发表的论文  51-52
中英文对照缩略词表  52-53
致谢  53-54
详细摘要  54-56

内皮祖细胞移植治疗慢性深静脉血栓的实验研究

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