目的:观察TGF—β1(转化生长因子β1)在酒精性肝病大鼠血清及肝脏中的含量,来探讨TGF—β1在酒精性肝纤维化中的作用。方法:55只Wistar雄性大鼠(体重200-250克),正常饲养一周之后,随机分成对照组和实验组:(1)实验组每日上午10时用56%乙醇[8g/(kg.d)灌胃一次,持续12周:对照组大鼠用灌等容量生理盐水灌胃;在温度20~26℃,湿度(70%-75%)的清洁级大理学院动物实验室分笼饲养,普通饲料喂养,自由饮水,。(2)实验组于第4,8,12周末分批处死10只大鼠,试验步骤为:大鼠禁食12h后称重,用10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉,通过股动脉取血,然后分离血清,检测血清谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)及TGF—β1含量。消毒开腹后把大鼠肝组织切下,分别称量肝湿重,并按照(肝指数=肝湿重/体质量×100%)公式计算出肝指数。(3)用10%甲醛溶液固定肝组织,制成石蜡切块,行HE染色,显微镜下观察酒精性肝病大鼠在不同时期肝脏细胞形态学改变;用免疫组化ABC法检测肝组织中TGF—β1含量,用ELISA法检测不同时期血清中TGF-β1的浓度。(4)采用SPSS16.0统计软件进行分析。TGF—β1, ALT,AST结果用x±s表示,各组间用T检验。P<0.05为差异具有统计学意义。结果:(1)第4,8,12周实验组大鼠肝组织出现慢性酒精性肝病的各种表现。4周:肝细胞明显水肿且排列紊乱,局部气球样变;8周:汇管区可见淋巴细胞不均匀浸润;12周:汇管区中央静脉高度扩张充血,局部出现轻度纤维化。(2)实验组各时间点之间大鼠血清ALT及AST差异有统计学意义(P<0.05),各时间点ALT及AST实验组与对照组之间差异有显著性(P<0.01)。(3)实验组大鼠血清第4,8,12周及对照组TGF—β1含量(ng/ml)经方差分析,各时间点TGF—β1间差异有显著性(P<0.05),第4,8,12周与对照组之间差异有显著性(P<0.05)。(4)TGF—β1免疫组化的结果表明,对照组TGF—β1为弱阳性,实验组TGF-β1呈棕黄色阳性表达,主要分布于血窦壁、中央静脉及门管区周围,邻近的肝细胞胞浆内量表达随着肝脏损害的加重而增多,TGF—β1阳性表达程度加强。
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