学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

转录因子RFX1调控狼疮T细胞CD11a和CD70基因表达的表观遗传机制研究

作　者: 吴晓燕
导　师: 陆前进
学　校: 中南大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 系统红斑狼疮 CD4~+T细胞转录因子 RFX1 SUV39H1 CD11a CD70
分类号: R593.241
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 75次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的大量研究证实表观遗传调控异常在系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus, SLE)发病中发挥重要作用。SLE患者CD4+T细胞中自身免疫相关基因CD11a和CD70表达水平异常升高与其启动子区DNA低甲基化和组蛋白H3高乙酰化密切相关。我们前期研究已经证实转录因子RFX1 (Regulatory factor X-box 1,RFX1)可升高CD11a和CD70基因的启动子甲基化水平,降低组蛋白H3乙酰化水平,从而抑制CD11a和CD70的表达,降低CD4+T细胞的自身反应性。然而,除DNA甲基化和组蛋白H3乙酰化外,RFX1是否参与调控CD11a和CD70基因启动子区的组蛋白甲基化修饰状态,目前尚未报道。本课题拟通过证实RFX1是否参与调控CDlla和CD70基因启动子区组蛋白H3K9三甲基化水平,从而进一步揭示SLE发病的表观遗传调控机制。方法密度梯度离心分离15例SLE患者和15例健康对照组的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4+T细胞。染色质免疫沉淀法(ChIP)和实时定量PCR来检测H3K9三甲基化水平；免疫共沉淀(co-IP) Western blot及间接免疫荧光染色法检测RFX1与组蛋白甲基转移酶抑制同源1(SUV39H1)的相互作用；用实时定量RT-PCR进行检测CDlla和CD70 mRNA表达水平。SUV39H1的蛋白表达水平用Western blot检测。结果在SLE患者CD4+T细胞中CD11a和CD70启动子区H3K9三甲基化水平显著降低(P<0.01); SUV39H1蛋白表达水平在SLECD4+T细胞与健康对照之间无显著差异(P>0.05)；co-IP实验和间接免疫荧光法证实CD4+T细胞中RFX1可与SUV39H1相互作用。过度表达RFX1可升高SLE患者CD4+T细胞中CDlla和CD70基因启动子区H3K9三甲基化水平(P<0.01),CD1 1a和CD70基因表达显著降低(P<0.01)。相反,特异性抑制RFX1表达可显著降低正常CD4+T细胞中CD11a和CD70基因启动子区H3K9三甲基化水平(P<0.01),CD11a和CD70基因表达显著升高(P<0.01)。结论RFX1通过招募SUV39H1到CD4+T细胞的CD11a和CD70的启动子区域,参与调节CD11a和CD70基因启动子区H3K9三甲基化水平,从而调控CD11a和CD70基因表达。以上研究进一步揭示了RFX1调控自身免疫相关基因CD11a和CD70表达的表观遗传机制,为全面阐明SLE发病的表观遗传学机理奠定基础。

转录因子RFX1调控狼疮T细胞CD11a和CD70基因表达的表观遗传机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文