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黄芪苷Ⅳ对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌细胞肥大保护作用的研究

作 者: 周红敏
导 师: 刘艳霞
学 校: 天津医科大学
专 业: 药理学
关键词: 黄芪苷Ⅳ 血管紧张素Ⅱ 心肌肥大 细胞内游离钙离子 肌浆网钙泵 钙调神经磷酸酶
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要


目的:研究黄芪苷Ⅳ(AstragalosideⅣ,AST)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠心肌细胞肥大的保护作用并探讨其作用机制。方法:心肌细胞常规培养72h,换无血清培养基同步化24h后,分别加入不同药物孵育72h。实验分6组:①正常对照组(Control):DMEM-F12培养基;②模型组(AngⅡ):AngⅡ10-7mol/L;③AST 10组:AST 10mg/L;④AST 20组:AST20mg/L;⑤AST 10+AngⅡ组:同时加入AST 10mg/L和AngⅡ10-7mol/L;⑥AST20+AngⅡ组:同时加入AST 20mg/L和AngⅡ10-7mol/L。采用图像分析系统测定细胞直径大小;考马斯亮蓝法测定细胞总蛋白含量;pNPP酶法测定心肌细胞肌浆网钙泵(Sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPases,SERCA)活力;Fura-2/AM标记,荧光分光光度计测定心肌细胞内[Ca2+]i;定磷法测定钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性。结果:1.细胞直径:与Control组比较,AST 10、AST 20两组细胞直径的增加无统计学差异(P>0.05),AngⅡ组的细胞直径显著增加(16.1±1.1 vs 11.1±1.0μm,P<0.01),AST 10+AngⅡ组心肌细胞直径增加(12.8±1.0 vs 11.1±1.0μm,P<0.01)、AST 20+AngⅡ组心肌细胞直径增加(12.4±0.9 vs 11.1±1.0μm,P<0.01);与AngⅡ组相比,AST 10+AngⅡ组与AST 20+AngⅡ组的细胞直径分别减小(12.8±1.0 vs16.1±1.1μm,P<0.01)、(12.4±0.9 vs 16.1±1.1μm,P<0.01)。2.细胞总蛋白含量:与Control组比较,AST 10、AST 20两组的细胞总蛋白含量的增加无统计学差异(P>0.05),AngⅡ组的细胞总蛋白含量明显增加(146.3±25.2 vs 95.9±20.5μg/well,P<0.01),AST 10+AngⅡ组心肌细胞总蛋白含量增加了(121.1±23.6 vs 95.9±20.5μg/well,P<0.05),AST 20+AngⅡ组心肌细胞总蛋白含量的增加无统计学差异(P>0.05);与AngⅡ组相比,AST 10+AngⅡ组与AST 20+AngⅡ组的细胞总蛋白含量分别减少(121.1±23.6 vs 146.3±25.2μg/well,P<0.01)、(114.1±18.0 vs 146.3±25.2μg/well,P<0.01)。内[Ca2+]i的升高无统计学差异(P>0.05),AngⅡ组的[Ca2+]i显著升高(283.9±40.7vs 150.6±27.1nmol/L,P<0.01),AST 10+AngⅡ组的心肌细胞内[Ca2+]i升高(204.8±33.9 vs 150.6±27.1nmol/L,P<0.01),AST 20+AngⅡ组的心肌细胞内[Ca2+]i升高(194.9±34.7 vs 150.6±27.1nmol/L,P<0.05);与AngⅡ组相比,AST 10+AngⅡ组与AST 20+AngⅡ组的细胞内[Ca2+]i分别降低(204.8±33.9 vs 283.9±40.7nmol/L,P<0.01)、(194.9±34.7 vs 283.9±40.7nmol/L,P<0.01)。4.SERCA活力:与Control组比较,AST 10、AST 20两组SERCA活力的降低无统计学差异(P>0.05),AngⅡ组的SERCA活力显著下降(0.83±0.20 vs2.07±0.45μmol/min·g pro,P<0.01),AST 10+AngⅡ组心肌细胞SERCA活力下降(1.29±0.23 vs 2.07±0.45μmol/min·g pro,P<0.01),AST 20+AngⅡ组心肌细胞SERCA活力下降(1.42±0.37 vs 2.07+0.45μmol/min·g pro,P<0.01);与AngⅡ组相比,AST 10+AngⅡ组与AST 20+AngⅡ组的SERCA活力均升高(1.29±0.23 vs0.83±0.20μmol/min·g pro,P<0.01)、(1.42±0.37 vs 0.83+0.20μmol/min·g pro,P<0.01)。5.CaN活性:与Control组比较,AST 10、AST 20两组CaN活性的升高无统计学差异(P>0.05),AngⅡ组的CaN活性明显增加(0.490±0.080 vs0.297±0.072μmol/mg pro,P<0.01),AST 10+AngⅡ组心肌细胞CaN活性升高(0.385±0.089 vs 0.297±0.072μmol/mg pro,P<0.05),AST 20+AngⅡ组心肌细胞CaN活性的升高无统计学差异(P>0.05);与AngⅡ组相比,AST 10+AngⅡ组与AST 20+AngⅡ组的CaN活性分别升高(0.385±0.089 vs 0.490±0.080μmol/mg pro,P<0.05)、(0.355±0.085 vs 0.490±0.080μmol/mg pro,P<0.01)。结论:本文首次报道AST对AngⅡ诱导心肌细胞肥大有明显的保护作用,其作用机制可能与提高SERCA活力,降低细胞内[Ca2+]i,抑制钙超载有关。本文还首次报道AST对AngⅡ诱导心肌细胞肥大保护作用的机制可能与其降低心肌细胞CaN的活性,抑制Ca2+-CaN信号转导通路有关。

全文目录


中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
缩略语表  10-11
前言  11-13
  研究现状、成果  11-12
  研究目的、方法  12-13
材料与方法  13-21
结果  21-34
讨论  34-46
结论  46-47
参考文献  47-53
综述  53-63
  心肌肥大与心肌细胞膜的T型钙通道  53-59
  综述参考文献  59-63
致谢  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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