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周期性张应变对正常和骨关节炎软骨细胞糖胺多糖分泌的影响

作　者: 许刚
导　师: 卫小春
学　校: 山西医科大学
专　业: 骨外科学
关键词: 骨关节炎软骨细胞应变应力糖胺多糖前交叉韧带切断术
分类号: R684.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:探讨正常与骨关节炎软骨细胞经周期性张应变刺激后糖胺多糖分泌的变化。方法:取3月龄新西兰白兔10只,随机分2组(即实验组与对照组),每组5只。实验组采用前交叉韧带切断术(ACLT)制作骨关节炎(OA)动物模型,对照组仅行双膝关节切开,但不行ACLT。各组动物于术后20周空气栓塞处死,取左侧膝关节标本分别做大体评分及Mankin’s评分,同时石蜡切片作HE染色观察OA造模情况。利用Flexercell4000基底加载系统对正常和骨关节炎中提取的软骨细胞施予5%、10%和15%强度周期性张应变刺激(6h/d,连续作用3天),于开始加载后的24h、48h与72h取培养上清液,Alcian blue染色沉淀法检测软骨细胞中主要蛋白多糖GAG的分泌变化情况。结果:实验组动物关节软骨明显退变,大体评分及Mankin’s评分均明显高于对照组(P<0.05);对照组软骨细胞在不同作用强度与作用时间下GAG分泌的含量均有差别(P<0.05),且随作用强度与作用时间的增加呈上升趋势;实验组软骨细胞在10%应力下GAG的含量最高,15%应力时表现为下降趋势(P<0.05);在48h时GAG的含量最高,而72h时表现为下降趋势(P<0.05)。结论:Flexercell-4000力学加载系统可对体外培养的软骨细胞进行精确的动态定量力学负荷加载,并从细胞水平上影响关节软骨细胞蛋白多糖的产生。OA时软骨细胞能承受的作用力强度与时间均发生了明显的变化。10%应力作用48h可最大限度促进OA软骨细胞蛋白多糖的分泌。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-8
材料与方法  8-12
  实验材料  8
  实验方法  8-12
    1 实验动物模型与分组  8
    2 手术方法  8
    3 大体观察及组织学观察  8-9
    4 软骨细胞的消化分离  9
    5 关节软骨细胞应力的加载  9-10
    6 糖胺多糖的检测  10-11
    7 统计分析  11-12
结果  12-16
  1 大体标本观察  12
  2 改良Mankin’s 评分  12
  3 HE 染色  12-13
  4 蛋白多糖含量测定检测及统计学分析  13-16
讨论  16-19
结论  19-20
参考文献  20-30
个人简介  30-31
致谢  31

周期性张应变对正常和骨关节炎软骨细胞糖胺多糖分泌的影响

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