学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

黄瓜不同抗性品种根分泌物及其对枯萎病病菌的影响

作　者: 王宏乐
导　师: 李世东
学　校: 中国农业科学院
专　业: 植物病理学
关键词: 黄瓜品种尖孢镰刀菌黄瓜专化型根系分泌物实时荧光定量PCR 类黄酮 LC-MS/MS 7,8-苯并黄酮
分类号: S642.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 179次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

黄瓜枯萎病是蔬菜生产上重要的土传病害,黄瓜根分泌物对黄瓜枯萎病的发生至关重要。本文主要研究黄瓜根系分泌物与黄瓜枯萎病病原菌的关系,为深入了解土传病害发生机制及防治提供理论依据。本研究建立了土壤中黄瓜枯萎病病原物的Real-time PCR监测方法,该方法能准确快速反应环境中的病原物数量变化,其检出限为2ng/g。该方法有很高的种特异性,土壤中其他的镰刀菌对黄瓜枯萎病原菌的监测无影响。本研究采用Real-time PCR研究黄瓜枯萎病感病品种津研4号和抗病品种中农10号根分泌物对土壤中黄瓜枯萎病病原菌的影响。监测结果表明,抗病品种和感病品种根际的枯萎病菌数量变化趋势明显不同。黄瓜种植后第14d,抗病品种根际的枯萎病菌菌量降到最低而感病品种根际的枯萎病菌菌量达到最高,LgQ分别为2.76±0.40和4.60±0.40,抗病品种菌量出现上升趋势比感病品种推迟14d。根分泌物对病原菌存活影响实验表明,抗病品种的根分泌物抑制枯萎病菌在土壤中的存活,感病品种的根分泌物却能延长枯萎病菌的存活时间。为了进一步研究这种现象产生的原因,作者通过测定黄瓜枯萎病感病品种津研4号和抗病品种中农10号根分泌物提取液对病原菌生长的影响,结果表明抗感品种根分泌物甲醇提取液对病原菌菌丝生长的影响存在显著差异。感病品种根分泌物甲醇提取液刺激病原菌生长,而抗病品种根分泌物甲醇提取液抑制病原菌生长。随后利用LC-MS/MS技术分别对感病品种和抗病品种根分泌物中的差异物质进行分析鉴定,发现抗病品种中农10号根分泌物中含有特异性物质7,8-苯并黄酮(7,8-BF),该物质在中农10号幼苗根分泌物中的含量为0.02μg/株。抗菌活性测定结果表明,黄瓜枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发在浓度为50μg/ml时均被显著抑制。100μg/ml的7,8-BF能显著抑制抗感品种胚根生长及侧根形成,但是抗病品种的耐受力高于感病品种。使用该物质浸泡抗感品种黄瓜种子,抗感品种受枯萎病侵染的程度显著降低。7,8-苯并黄酮浓度为50μg/ml时,感病品种病情指数从71.7降为30.8,达到中抗水平。根分泌物是土传病害发生的重要因子之一。因此,从化学生态角度进一步研究根分泌物组分对病原物的作用,对研究根分泌物与抗病性的关系有十分重要的意义。本研究为了解土传病害发生机理及其控制提供理论基础。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-12
第一章引言  12-21
  1.1 国内外研究现状  12-20
    1.1.1 黄瓜枯萎病及其抗病性研究  12-13
    1.1.2 根分泌物与土传病害关系研究  13-15
    1.1.3 土壤病原微生物的研究技术  15-17
    1.1.4 实时定量 PCR 技术在土壤病原微生物研究的应用  17-20
  1.2 本研究目的与意义  20-21
第二章黄瓜枯萎病菌在土壤中的定量监测  21-34
  2.1 材料与方法  21-28
    2.1.1 黄瓜枯萎病菌的分离及致病性测定  21-22
    2.1.2 供试土壤  22
    2.1.3 黄瓜枯萎病病菌的荧光定量 PCR 体系的建立  22-27
    2.1.4 土壤中黄瓜枯萎病病原菌的监测  27
    2.1.5 数据处理及分析  27-28
  2.2 结果与分析  28-33
    2.2.1 黄瓜枯萎病菌致病性测验结果  28
    2.2.2 DNA 的提取与检测  28-29
    2.2.3 引物特异性检验  29
    2.2.4 F. o. f.sp. cucumerinum RAPD marker OPZ-12 的重组质粒鉴定  29-31
    2.2.5 重组质粒标准曲线  31-32
    2.2.6 土壤中 F.o. c.的定量监测  32-33
  2.3 讨论  33-34
第三章黄瓜根分泌物对土壤中枯萎病菌生物量的影响  34-40
  3.1 材料与方法  34-35
    3.1.1 黄瓜抗感品种发病率及其根际黄瓜枯萎病菌的动态变化  34-35
    3.1.2 黄瓜抗感品种根分泌物对土壤中黄瓜枯萎病菌存活的影响  35
    3.1.3 数据处理及分析  35
  3.2 结果与分析  35-39
    3.2.1 黄瓜抗感品种发病率及其根际黄瓜枯萎病菌的动态变化  35-37
    3.2.2 根分泌物中糖含量测定  37-38
    3.2.3 根分泌物对土壤中黄瓜枯萎病菌存活的影响  38-39
  3.3 讨论  39-40
第四章黄瓜根分泌物中的类黄酮物质的分析  40-45
  4.1 材料与方法  40-41
    4.1.1 供试材料  40-41
    4.1.2 育苗及根分泌物的收集  41
    4.1.3 根系分泌物浓缩液对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的影响  41
    4.1.4 根系分泌物甲醇提取液的液相色谱-质谱联用分析  41
    4.1.5 实验数据处理  41
  4.2 结果与分析  41-44
    4.2.1 根系分泌物提取液对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的影响  41-42
    4.2.2 黄瓜根分泌物甲醇提取液分析  42-44
  4.3 讨论  44-45
第五章 7,8-苯并黄酮的抑菌活性及防治效果测定  45-52
  5.1 材料与方法  45-46
    5.1.1 供试材料  45
    5.1.2 黄瓜抗感品种差异物质苯并黄酮抗菌活性测定  45-46
    5.1.3 实验数据处理  46
  5.2 结果与分析  46-50
    5.2.1 7,8-苯并黄酮对 Foc 菌丝生长的影响  46-47
    5.2.2 7,8-苯并黄酮对黄瓜枯萎病原孢子萌发的影响  47-48
    5.2.3 7,8-苯并黄酮对黄瓜种子萌发的影响  48-49
    5.2.4 7,8-苯并黄酮对黄瓜枯萎病的防治效果测定  49-50
  5.3 讨论  50-52
第六章结论  52-53
参考文献  53-60
致谢  60-61
作者简历  61

黄瓜不同抗性品种根分泌物及其对枯萎病病菌的影响

内容摘要

全文目录

相似论文