学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

血当归粗提物体外成骨活性研究

作　者: 徐宗
导　师: 王朝元
学　校: 中南民族大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 血当归提取物 成骨细胞 细胞增殖活性 细胞周期 碱性磷酸酶活性
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 8次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


促进骨损伤修复药物的开发一直是当前生物医学界热门研究方向之一。从中药中提取毒副作用小的相关药物并研究其机理具有十分重要的理论意义和临床应用前景。血当归为我国土家族民间常用的药材,具有活血通经等功效。特别是血当归在治疗骨折、跌打损伤等有显著疗效。但其有效成分是什么,有效成分作用的机理是什么?目前知之甚少。本研究以传统中药血当归粗提物为材料,用小鼠成骨细胞为细胞模型,研究其对体外培养的成骨细胞活性的影响,以期为鉴定其活性成分及了解作用机理提供实验依据。将血当归用甲醇、乙酸乙酯等抽提,分别获得其甲醇提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物,用各提取物处理体外培养的小鼠成骨细胞,研究这些药物对成骨细胞生长及成骨活性的影响。从新生的昆明小鼠颅盖骨分离原代小鼠成骨细胞,用含10%新生小牛血清的DMEM培养基培养。分别用1.0×10-2、10-3、10-4、10-5 mg/ml血当归甲醇提取物、乙酸乙酯提取物、水提取物处理成骨细胞。研究血当归甲醇提取物、乙酸乙酯提取物、水提取物各个浓度对成骨细胞增殖活性、细胞周期以及其碱性磷酸酶活性的影响。用CCK-8法研究血当归粗提物对成骨细胞增殖活性的影响。结果显示,1.0×10-3、1.0×10-4和1.0×10-5mg/ml的血当归甲醇提取物,1.0×10-3、1.0×10-4、、1.0×10-5mg/ml乙酸乙酯提取物和1.0×10-3、1.0×10-4、1.0×10-5mg/ml水提取物能够促进成骨细胞的增殖（p<0.05）。用流式细胞术研究血当归粗提物对成骨细胞细胞周期的影响。结果表明,1.0×10-4mg/ml的血当归甲醇提取物,1.0×10-3、1.0×10-4和1.0×10-5mg/ml的乙酸乙酯提取物,以及1.0x10-2、1.0x10-3、1.0x10-4mg/ml的水提取物能促进成骨细胞的进入细胞周期的S期,细胞增殖指数较高。其他实验组无显著的差别。用碱性磷酸酶试剂盒检测受到血当归1.0×10-3、10-4 mg/ml甲醇提取物,1.0×10-3、10-4、10-5 mg/ml乙酸乙酯提取物,1.0×10-3 mg/ml水提取物处理均有促进成骨细胞碱性磷酸酶的活性。其他实验组无促进效应。结论:血当归的甲醇,乙酸乙酯,水提取物均能促进成骨细胞的增殖和分化。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-11
第1章 前言  11-15
  参考文献  14-15
第2章 原代小鼠颅盖骨成骨细胞的分离、培养和鉴定  15-33
  2.1 引言  15-16
  2.2 材料和方法  16-23
    2.2.1 主要试剂、仪器和溶液配制  16-19
      2.2.1.1.主要试剂及材料  16-17
      2.2.1.2. 实验仪器  17-18
      2.2.1.3.溶液配制  18-19
      2.2.1.4. 溶液以及器皿的灭菌  19
    2.2.2 实验方法  19-23
      2.2.2.1 小鼠颅盖骨原代细胞培养  19-20
      2.2.2.2 小鼠颅盖骨原代细胞特性研究  20-23
  2.3 实验结果  23-28
    2.3.1 原代细胞及传代细胞形态观察  23-24
    2.3.2 GIEMSA 染色  24-25
    2.3.3 CCK-8 测定细胞增殖  25-26
    2.3.4 成骨细胞碱性磷酸酶活性  26-28
  2.4 讨论  28-31
  参考文献  31-33
第3章 血当归提取物对成骨细胞增殖的影响  33-41
  3.1 引言  33-34
  3.2 材料和方法  34-35
    3.2.1 实验材料和试剂  34
    3.2.2 方法  34-35
      3.2.2.1.血当归提取物的配制  34
      3.2.2.2 CCK-8 法线性关系考察  34-35
      3.2.2.3 血当归提取物对成骨细胞增殖活性的影响测定  35
      3.2.2.4 统计方法  35
  3.3 结果  35-38
    3.3.1 CCK-8 法线性关系考察  35-36
    3.3.2 提取物对成骨细胞增殖的影响  36-38
  3.4 讨论  38-40
  参考文献  40-41
第4章 血当归粗提物对体外培养成骨细胞细胞周期的影响  41-52
  4.1 引言  41-42
  4.2 材料和方法  42-43
    4.2.1 实验材料和试剂  42
    4.2.2 实验方法  42-43
      4.2.2.1 细胞培养及细胞前处理  42-43
      4.2.2.2 统计分析  43
  4.3 结果  43-49
    4.3.1 甲醇提取物对细胞周期的影响  44-45
    4.3.2 乙酸乙酯提取物对细胞周期的影响  45-46
    4.3.3 水提取物对细胞周期的影响  46-49
  4.4 讨论  49-51
  参考文献  51-52
第5章 血当归粗提物对成骨细胞碱性磷酸酶活性影响的研究  52-59
  5.1 引言  52
  5.2 材料和方法  52-53
    5.2.1 材料  52-53
    5.2.2 方法  53
      5.2.2.1 碱性磷酸酶试剂盒有效性考察  53
      5.2.2.2 成骨细胞碱性磷酸酶活性测定  53
      5.2.2.3 统计分析  53
  5.3 结果  53-56
    5.3.1 ALP 试剂盒法有效性考察  53-54
    5.3.2 血当归提取物对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响  54-56
  5.4 讨论  56-57
  参考文献  57-59
致谢  59-60
附录：攻读学位期间发表论文  60

相似论文

  1. 冬凌草甲素调控周期相关蛋白抑制SGC-7901细胞增殖作用的研究,R285
  2. 雌激素及chOPG对鸡胚BMSCs诱导的成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期以及BGP与ColⅠmRNA表达的影响,S858.31
  3. 小鼠脂肪源干细胞的体外分离培养及成骨诱导前后造血调控相关因子表达的实验研究,R329
  4. 纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架材料复合大鼠成骨细胞培养的实验研究,R318.08
  5. 兔体外成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究,R329
  6. As2O3对体外培养成骨细胞增殖与凋亡和BMP-2基因表达的影响,R363
  7. 胎盘间充质干细胞体外分离培养及向成骨细胞和神经细胞分化的研究,R329
  8. 罗格列酮对OLETF大鼠股骨骨密度及成骨细胞BMP-2和Bcl-xL表达的影响,R587.1
  9. rhIGF-1对成骨细胞和破骨细胞相互作用的调节作用,R580
  10. 氟对大鼠成骨细胞Nrf2-ARE信号转导通路的作用研究,R599
  11. 甲状旁腺激素羧基端肽段细胞凋亡作用的研究,R341
  12. 力生长因子E肽（MGF-Ct24E）与应力作用对成骨细胞基因表达影响的基因芯片分析,R329
  13. 阿魏酸通过调节钠离子通道（ENaC）介导骨形成的研究,R285.5
  14. 羧甲基壳聚糖钙体外细胞毒性实验研究,R318.08
  15. 具有区段定向诱导分化活性的仿生组织工程韧带的研究,R318.08
  16. 成骨细胞中肌动蛋白对cAMP调节的L-型钙通道的作用及其分子机制,R966
  17. PPARγ激动剂对大鼠成骨细胞增殖分化的影响及其作用机制的研究,R965
  18. 592nm和630nm低强度激光对人皮肤成纤维细胞的刺激效应,R751
  19. 两种不同来源桦褐孔菌多糖的抗氧化与免疫活性的研究,R285.5
  20. 川芎嗪对软骨细胞活性及CDK4、CyclinD1影响的实验研究,R285
  21. Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com