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PRRSV不同毒株对仔猪致病性比较及其灭活疫苗免疫效果观察

作　者: 唐波
导　师: 姜平
学　校: 南京农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 致病特性 细菌多糖 灭活疫苗 免疫保护
分类号: S852.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproduction and respiratory syndrome,PRRS)是以母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状为主要特征的具有高度传染性的病毒病。该病1987年最早发现于美国,目前该病在我国大部分地区已经广泛流行。不同时间不同地区分离的毒株其致病性有所不同。目前该病给我国当前的养猪业带来了非常严重的危害,但尚无有效的防制方法。2006年,在我国南方地区暴发了以高致病性PRRSV为主要病原的以高热、高发病率为特征的传染病,本实验室在流行病原调查的基础上分离获得一株PRRSV SY0608高变异株。本文进一步评价了该变异毒株的致病特性并研制出了针对高致病性PRRSV的灭活疫苗,以期获得比较理想的免疫效果。PRRSV不同分离株对仔猪致病性的比较研究:本研究采用11头30日龄PRRSV阴性仔猪,随机分为3组。第一组5头接种S1毒株,第二组4头接种SY0608毒株,第三组2头作为空白对照。攻毒后通过观察临床症状、病理学变化和病毒在组织中的分布,进一步研究该高变异病毒株对仔猪的致病特性。结果为:(1)SY0608毒株感染组仔猪表现明显临床症状,接种3天后体温急剧升高至41.8℃;白细胞数急剧减少(降低了45%);病理学变化严重,肺泡膈增宽,大部分肺组织肺泡不张;而S1株感染组仔猪仅出现轻微临床症状和病理变化。(2)SY0608毒株感染组仔猪病毒血症持续时间较S1毒株感染组长,病毒在脏器中的分布更为广泛。(3)SY0608株感染组血清ELISA抗体水平明显高于S1株感染组。结果表明SY0608毒株对仔猪致病作用要明显强于S1毒株猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察:本研究选用本实验室分离鉴定的PRRSV-SY0608强毒株病毒液,分别采用细菌多糖和白油为佐剂制成油乳剂PRRS灭活疫苗。采用商品化仔猪进行免疫保护试验,二免后3周用SY0608强毒株攻毒。结果为:(1)PRRSV白油佐剂灭活疫苗免疫后35天,用同源PRRSV强毒攻击,其临床症状病理变化与非免疫攻毒对照组无明显差异。(2)PRRSV-多糖白油佐剂灭活苗免疫组间隔3周,加强免疫,结果ELISA抗体则有明显升高。非免疫对照组仔猪出现明显临床症状病理变化,免疫组仔猪也出现临床症状,但症状轻微,病程缩短,病理学变化也明显轻微,病毒血症,鼻、肛排毒及不同组织中PRRSV阳性率则无显著差别。本研究结果表明SY0608毒株致病性明显强于十年前我国分离的传统毒株S1,其组织嗜性明显广泛;通过免疫保护试验证实,该研究制备的PRRSV-多糖白油佐剂灭活疫苗具有一定保护作用,其免疫保护效果优于PRRSV白油佐剂灭活疫苗仍不是很理想,需进一步改进。

全文目录


摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展  11-31
  1 病原学  11-15
    1.1 形态特征  11-12
    1.2 理化特征  12
    1.3 生物学特征  12
    1.4 基因组成及其功能  12-13
    1.5 基因型与基因变异  13-15
  2 流行病学  15-16
  3 发病机制  16
  4 临床症状  16-17
    4.1 急性感染型  16-17
    4.2 慢性型  17
    4.3 亚临床型  17
  5 病理变化  17-18
  6 诊断方法  18-20
    6.1 临床诊断  18
    6.2 组织病理学诊断  18
    6.3 血清学诊断  18-19
    6.4 病毒的分离  19
    6.5 分子生物学诊断  19-20
    6.6 免疫组化法  20
  7 疫苗研究进展  20-23
    7.1 弱毒疫苗  20-21
    7.2 灭活苗  21-22
    7.3 亚单位疫苗  22
    7.4 基因工程重组疫苗  22-23
    7.5 DNA疫苗  23
  8 结语  23-25
  参考文献  25-31
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒不同分离株对仔猪致病性的比较  31-43
  1 材料和方法  31-34
    1.1 病毒  31-32
    1.2 细胞及细胞培养液  32
    1.3 主要试剂和仪器  32
    1.4 病毒TCID_(50)的测定  32
    1.5 仔猪人工感染试验  32
    1.6 血相检测  32
    1.7 病理学检查  32-33
    1.8 RT-PCR检测PRRSV  33
    1.9 PRRSV特异性ELISA抗体检测  33-34
  2 结果  34-39
    2.1 ELISA抗体  34
    2.2 临床症状比较  34-35
    2.3 血相检测比较  35
    2.4 病理变化  35-37
    2.5 病毒血症  37-38
    2.6 不同组织中PRRSV检测  38-39
  3 讨论  39
  4 小结  39-40
  参考文献  40-43
第三章 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察  43-56
  1 材料和方法  43-46
    1.1 材料  43-44
    1.2 PRRSV的增殖及其滴度测定  44
    1.3 PRRSV的灭活及检验  44
    1.4 油乳剂灭活苗的制备  44
    1.5 油佐剂灭活疫苗的质量检验  44
    1.6 免疫保护试验设计  44-45
    1.7 组织病理学检查  45
    1.8 PRRSV RT-PCR检测  45-46
    1.9 ELISA试验  46
  2 结果  46-52
    2.1 PRRSV增殖及其滴度测定  46
    2.2 灭活病毒的检验  46
    2.3 灭活疫苗物理性状测定  46
    2.4 疫苗安全性  46-47
    2.5 仔猪免疫保护试验  47-52
  3 讨论  52-53
  4 小结  53-54
  参考文献  54-56
全文总结  56-57
致谢  57

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医基础科学 > 家畜微生物学（兽医病原微生物学） > 家畜病毒学
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