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低强度脉冲超声波对体外培养兔软骨细胞MMP-13与Ⅱ型胶原的影响

作　者: 安恒远
导　师: 李雪萍
学　校: 南京医科大学
专　业: 康复医学与理疗学
关键词: 低强度脉冲超声波软骨细胞金属蛋白酶 Ⅱ型胶原
分类号: R684
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:研究低强度脉冲超声波(Low intensity pulsed ultrasound, LIPUS)对体外培养兔膝关节软骨细胞增殖、软骨细胞中金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)及Ⅱ型胶原的影响,探讨LIPUS对软骨细胞活性的促进作用及机制。方法:选用6只1月龄的新西兰白,取兔双膝关节软骨进行体外培养。体外培养每只兔膝关节软骨细胞传至第二代后,均分为对照组与4个LIPUS照射组,LIPUS强度分别是20 mW /cm2、30 mW /cm2、40 mW /cm2、50 mW /cm2,每天照射20min,连续10天。每天进行细胞计数;分别在照射第0天、5天、10天收集细胞,提取软骨细胞全蛋白及RNA,采用Western-blot技术、qRT-PCR技术检测软骨细胞中MMP-13、Ⅱ型胶原的含量。结果:1.软骨细胞计数:与对照组相比,各LIPUS照射组软骨细胞数均明显增高(P<0.05),其中40 mW /cm2组软骨细胞数最高,与其它各照射组比较有显著性差异(P<0.05); 2. MMP-13含量检测:与0天比较,细胞培养5天和10天后,各组MMP-13含量均明显升高(P<0.05);但与对照组相比,各照射组MMP-13含量均显著降低(P<0.05),其中40 mW /cm2组MMP-13含量最低(P<0.05); 3.Ⅱ型胶原表达量检测:与0天比较,细胞培养5天和10天后,各组Ⅱ型胶原表达量均显著降低(P<0.05);但与对照组相比,各照射组Ⅱ型胶原表达量均显著升高(P<0.05),其中40 mW /cm2组Ⅱ型胶原表达量最高(P<0.05); 4. MMP-13与Ⅱ型胶原相关性:分析各组细胞培养0天、5天和10天的MMP-13与Ⅱ型胶原表达量,两者呈负相关(r=-0.757,p<0.05)。结论:不同强度的LIPUS照射可促进体外培养兔膝关节软骨细胞的活性,其作用与软骨细胞增殖、MMP-13、Ⅱ型胶原的表达变化相关。

全文目录

中英文缩略对照  5-6
中文摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9-12
  1. 关节软骨损伤与骨性关节炎的发生  9-10
  2. 低强度脉冲超声波对软骨细胞及软骨修复的研究现状  10-12
1 材料与方法  12-27
  1.1 实验设计  12-13
  1.2 实验动物、设备、材料及试剂  13-14
  1.3 实验方法  14-17
  1.4 主要检测指标及技术  17-25
  1.5 统计分析  25-27
2 结果  27-31
  2.1 LIPUS 对体外培养软骨细胞增殖的影响  27
  2.2 LIPUS 对MMP-13、Ⅱ型胶原的影响  27-30
  2.3 LIPUS 对MMP-13、Ⅱ型胶原影响的相关性分析  30-31
3 讨论  31-35
  3.1 不同强度LIPUS 对体外培养软骨细胞的增殖作用  31-32
  3.2 LIPUS 对体外培养软骨细胞中MMP-13 及Ⅱ型胶原表达量的影响  32-33
  3.3 LIPUS 干预与MMP-13、Ⅱ型胶原的相互作用  33
  3.4 研究的创新性  33-35
4 小结  35-36
5 参考文献  36-41
文献综述  41-51
  参考文献  46-51
已发表论文  51-64
致谢  64

低强度脉冲超声波对体外培养兔软骨细胞MMP-13与Ⅱ型胶原的影响

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