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银杏叶提取物对慢性肾衰竭大鼠肾组织ACE2、TGF-β1表达影响的实验研究

作　者: 朱诗平
导　师: 孙升云
学　校: 暨南大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 慢性肾衰竭肾间质纤维化血管紧张素转换酶2 转化生长因子-β1 银杏叶提取物
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察血管紧张素转换酶2 (ACE2)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)在腺嘌呤致慢性肾衰竭模型大鼠肾脏组织中的表达水平及银杏叶提取物(EGb761)对其表达水平的影响。方法：复制腺嘌呤致慢性肾衰竭大鼠模型,随机分成模型对照组、氯沙坦组、EGb761组和结合组。氯沙坦组大鼠予氯沙坦(10mg·kg-1·d-1)混悬液灌胃；EGb761治疗组大鼠予EGb761 (100mg·kg-1·d-1)混悬液灌胃；结合组给予氯沙坦(10mg·kg-1·d-1)和EGb761 (100mg·kg-1·d-1)灌胃；模型组予等量蒸馏水灌胃,共30天。另设正常对照组,予等量蒸溜水灌胃。在实验结束时,处死所有大鼠,留取血、尿、肾组织标本,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白定量(24h MTP)等指标；HE染色观察肾脏组织的病理改变；采用免疫组化检测肾组织ACE2蛋白表达水平；采用实时荧光定量PCR (Real TimePCR)检测ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平。结果：1.模型组大鼠的Scr、BUN、24h MTP、肾重、肾脏指数较正常组显著升高(P<0.01)；氯沙坦组、EGb761组和结合组的Scr、BUN、24h MTP、肾重、肾脏指数较模型组明显下降(P<0.05)。2.免疫组化检测ACE2蛋白的结果：模型组ACE2蛋白表达阳性面积百比分、累积光密度(IOD)较正常组肾组织均显著降低(P<0.01); EGb761组、氯沙坦组和结合组ACE2蛋白表达阳性面积百比分、累积光密度(IOD)较模型组明显增加(P<0.05),组间无统计学差别。3. Real Time PCR检测ACE2 mRNA的结果：模型组ACE2 mRNA表达量较正常组显著减少(P<0.01),仅为正常组的0.26倍,下降幅度达74%。氯沙坦组、EGb761组、结合组ACE2 mRNA表达量较模型组均有显著增加(P<0.01),分别上升了2.34倍、2.56倍、2.68倍,各治疗组之间没有统计学差异。4. Real Time PCR检测TGF-β1 mRNA的结果：模型组TGF-β1 mRNA表达量较正常组上升了5.92倍,具有明显统计学差异(P<0.01)。氯沙坦组、EGb761组和结合组TGF-β1 mRNA表达量较模型组均有明显下降(P<0.05),下降幅度分别为43%、43%、33%,其中氯沙坦组、EGb761组对TGF-β1 mRNA表达量的下调更为显著(P<0.01)。结论：1.本实验采用的疾病模型大鼠Scr、BUN、24h MTP和组织形态学变化表明,慢性肾衰竭大鼠模型是成功的。2. EGb761能明显改善腺嘌呤致慢性肾衰竭模型大鼠的肾功能,其机制可能与增加ACE2蛋白和mRNA表达水平,而抑制TGF-β1 mRNA表达水平有关。3.氯沙坦具有肾功能保护作用,其作用机制除了拮抗ATIR外,可能与增加ACE2蛋白和mRNA表达水平,而抑制TGF-β1 mRNA表达水平相关。4. EGb761和氯沙坦单用均具有保护肾功能的作用,而联合应用对肾功能的改善作用并没有协同作用,这对中西医结合防治慢性肾衰竭的临床工作具有重要的指导意义。

银杏叶提取物对慢性肾衰竭大鼠肾组织ACE2、TGF-β1表达影响的实验研究

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