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砷染毒对大鼠红细胞的影响及N-ACys干预研究
作 者: 马智峰
导 师: 裴秋玲
学 校: 山西医科大学
专 业: 卫生毒理学
关键词: 亚砷酸钠 红细胞 红细胞膜蛋白 N-乙酰-L-半胱氨酸
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 24次
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内容摘要
目的:研究低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞的影响,探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N-Acetyl Cysteine,N-ACys)对其的干预作用,进一步评价砷对红细胞的毒性,为慢性砷中毒机制和防治研究、更好发挥砷剂的治疗作用以及减少毒副作用提供重要的科学依据。方法:选择30只SD大鼠,随机分为三组,每组10只,即对照组(给予普通洁净自来水),染毒组(自由饮用含360μg/L砷水),N-乙酰-L-半胱氨酸(Cysteine,Cys)干预组(饮用含360μg/L砷水,隔天灌胃Cys 20mg/kg体重)。每周称量一次大鼠体重,染毒4周后将其处死。计算各器官脏器系数; SDS-PAGE凝胶电泳分离并分析红细胞膜蛋白; MEK-6318K全自动血细胞分析仪测定红细胞参数;血液流变测试仪测定血流变,流式细胞仪红细胞衰亡率;扫描电镜观察红细形态变化;结果采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果:1.随着时间的延长,SD大鼠体重均有增加,其中Cys干预组大鼠体重增幅最大,但组间差异没有统计学意义(P>0.05);各器官脏器系数与红细胞参数组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。2.血流变测定指标中,与对照组相比,染毒组全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显增高(P<0.05);Cys干预组与染毒组相比,全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显下降(P<0.05);全血高切表观粘度和血浆粘度组间无统计学意义(P>0.05)。3.采用SDS-PAGE分离获得红细胞膜α-血影蛋白(Spectrin-α)、β-血影蛋白(Spectrin-β)、锚蛋白(Ankyrin)、带3蛋白(Band 3)、带4.2蛋白(Band 4.2)和肌动蛋白(Actin),共6种蛋白。染毒组红细胞膜带3蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),锚蛋含量明显低于对照组(P<0.05); Cys干预组与染毒组相比,红细胞膜带3蛋白含量降低(P<0.05),锚蛋白含量增高(P<0.05);α-血影蛋白、β-血影蛋白、带4.2蛋白和肌动蛋白各组间均无统计学意义(P>0.05)。4.与对照组相比,染毒组红细胞衰亡率明显增加(P<0.05);Cys干预组与染毒组相比,干预组红细胞衰亡率显著下降(P>0.05)。5.红细胞形态电镜观察结果显示:对照组红细胞形态正常,为双凹圆盘形,表面光滑规整、细胞大小均匀;染毒组红细胞边缘不规整,细胞出现刺状或棘状突起;干预组红细胞形态基本恢复正常。结论:低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞参数没有明显影响,但可造成红细胞聚集和血粘度增加进而引起血液流变学改变;低剂量亚砷酸钠可致大鼠红细胞膜蛋白表达异常,表现为带3蛋白增高,锚蛋白减少;低剂量亚砷酸钠可引起大鼠红细胞形态学改变和衰亡;Cys对亚砷酸钠所致红细胞毒性具有一定的干预作用。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-8 缩略词 8-9 前言 9-11 材料与方法 11-14 1. 实验动物 11 2. 主要仪器 11 3. 主要试剂 11-12 5. 实验方法 12-14 5.1 动物模型建立 12 5.2 红细胞参数检测 12 5.3 红细胞膜分离及红细胞膜蛋白定量 12 5.4 红细胞膜蛋白SDS-PAGE 12-13 5.5 电泳图谱的分析 13 5.6 流式细胞仪测定红细胞衰亡的原理及方法 13-14 5.7 扫描电镜检查红细胞形态 14 结果 14-19 1. 大鼠的一般情况 14-15 1.1 体重变化 14 1.2 脏器系数 14-15 2. 大鼠红细胞参数检测 15 3. 大鼠血流变测试结果 15-16 4. 大鼠红细胞膜蛋白电泳分离和含量分析 16-17 5. 大鼠血红细胞衰亡检测 17-18 6. 红细胞扫描电镜结果 18-19 讨论 19-22 1、亚砷酸钠对血液流变学的影响 19 2、亚砷酸钠对红细胞膜蛋白的影响 19-20 3、亚砷酸钠对红细胞衰亡的影响 20-21 4、亚砷酸钠对红细胞形态结构的影响 21-22 结论 22-23 参考文献 23-26 综述 26-31 参考文献 29-31 个人简历 31-32 致谢 32
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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