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砷染毒对大鼠红细胞的影响及N-ACys干预研究

作 者: 马智峰
导 师: 裴秋玲
学 校: 山西医科大学
专 业: 卫生毒理学
关键词: 亚砷酸钠 红细胞 红细胞膜蛋白 N-乙酰-L-半胱氨酸
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 24次
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内容摘要


目的:研究低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞的影响,探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N-Acetyl Cysteine,N-ACys)对其的干预作用,进一步评价砷对红细胞的毒性,为慢性砷中毒机制和防治研究、更好发挥砷剂的治疗作用以及减少毒副作用提供重要的科学依据。方法:选择30只SD大鼠,随机分为三组,每组10只,即对照组(给予普通洁净自来水),染毒组(自由饮用含360μg/L砷水),N-乙酰-L-半胱氨酸(Cysteine,Cys)干预组(饮用含360μg/L砷水,隔天灌胃Cys 20mg/kg体重)。每周称量一次大鼠体重,染毒4周后将其处死。计算各器官脏器系数; SDS-PAGE凝胶电泳分离并分析红细胞膜蛋白; MEK-6318K全自动血细胞分析仪测定红细胞参数;血液流变测试仪测定血流变,流式细胞仪红细胞衰亡率;扫描电镜观察红细形态变化;结果采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果:1.随着时间的延长,SD大鼠体重均有增加,其中Cys干预组大鼠体重增幅最大,但组间差异没有统计学意义(P>0.05);各器官脏器系数与红细胞参数组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。2.血流变测定指标中,与对照组相比,染毒组全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显增高(P<0.05);Cys干预组与染毒组相比,全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显下降(P<0.05);全血高切表观粘度和血浆粘度组间无统计学意义(P>0.05)。3.采用SDS-PAGE分离获得红细胞膜α-血影蛋白(Spectrin-α)、β-血影蛋白(Spectrin-β)、锚蛋白(Ankyrin)、带3蛋白(Band 3)、带4.2蛋白(Band 4.2)和肌动蛋白(Actin),共6种蛋白。染毒组红细胞膜带3蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),锚蛋含量明显低于对照组(P<0.05); Cys干预组与染毒组相比,红细胞膜带3蛋白含量降低(P<0.05),锚蛋白含量增高(P<0.05);α-血影蛋白、β-血影蛋白、带4.2蛋白和肌动蛋白各组间均无统计学意义(P>0.05)。4.与对照组相比,染毒组红细胞衰亡率明显增加(P<0.05);Cys干预组与染毒组相比,干预组红细胞衰亡率显著下降(P>0.05)。5.红细胞形态电镜观察结果显示:对照组红细胞形态正常,为双凹圆盘形,表面光滑规整、细胞大小均匀;染毒组红细胞边缘不规整,细胞出现刺状或棘状突起;干预组红细胞形态基本恢复正常。结论:低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞参数没有明显影响,但可造成红细胞聚集和血粘度增加进而引起血液流变学改变;低剂量亚砷酸钠可致大鼠红细胞膜蛋白表达异常,表现为带3蛋白增高,锚蛋白减少;低剂量亚砷酸钠可引起大鼠红细胞形态学改变和衰亡;Cys对亚砷酸钠所致红细胞毒性具有一定的干预作用。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-8
缩略词  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-14
  1. 实验动物  11
  2. 主要仪器  11
  3. 主要试剂  11-12
  5. 实验方法  12-14
    5.1 动物模型建立  12
    5.2 红细胞参数检测  12
    5.3 红细胞膜分离及红细胞膜蛋白定量  12
    5.4 红细胞膜蛋白SDS-PAGE  12-13
    5.5 电泳图谱的分析  13
    5.6 流式细胞仪测定红细胞衰亡的原理及方法  13-14
    5.7 扫描电镜检查红细胞形态  14
结果  14-19
  1. 大鼠的一般情况  14-15
    1.1 体重变化  14
    1.2 脏器系数  14-15
  2. 大鼠红细胞参数检测  15
  3. 大鼠血流变测试结果  15-16
  4. 大鼠红细胞膜蛋白电泳分离和含量分析  16-17
  5. 大鼠血红细胞衰亡检测  17-18
  6. 红细胞扫描电镜结果  18-19
讨论  19-22
  1、亚砷酸钠对血液流变学的影响  19
  2、亚砷酸钠对红细胞膜蛋白的影响  19-20
  3、亚砷酸钠对红细胞衰亡的影响  20-21
  4、亚砷酸钠对红细胞形态结构的影响  21-22
结论  22-23
参考文献  23-26
综述  26-31
  参考文献  29-31
个人简历  31-32
致谢  32

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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