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银屑病患者骨髓间充质干细胞转分化为血管内皮细胞的初步研究

作　者: 张永翠
导　师: 张开明
学　校: 山西医科大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 银屑病 BMMSCs 差异表达基因 VEC VEGF
分类号: R758.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

【目的】将银屑病患者骨髓间充质干细胞(Bone marrow Mesenchymal Stem Cells,BMMSCs)体外分化为血管内皮细胞(VEC),并对定向分化的VEC活性进行初步研究,为银屑病患者BMMSCs生物特性的深入研究提供依据。【方法】①采用密度梯度离心法分离银屑病患者与对照组骨髓单个核细胞,通过贴壁法培养BMMSCs,用流式细胞仪鉴定细胞表面标志;②加入血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导BMMSCs向VEC分化,流式细胞仪进行细胞表型鉴定;③免疫细胞荧光技术鉴定VEC标志物KDR、VWF的表达;④体外血管成形试验检测诱导的内皮细胞体外成形能力;⑤用transwell小室测诱导的VEC对T细胞的迁移能力。⑥并对在培养分化过程中,发现1例双亲均患病的银屑病患者BMMSCs在原代即开始向VEC分化,采用了高通量RNA测序技术对其差异表达基因进行了筛选。【结果】①流式测定显示两组培养的BMMSCs高表达CD44、CD29,而HLA-DR、CD45、CD34阴性表达,说明所培养的BMMSCs纯度较高;②银屑病组CD34、CD45、ICAM-1、HLA-R阳性表达,且明显高于对照组(p﹤0.05);③免疫细胞化学显示两组都可分化为VEC;④银屑病患者诱导的VEC具有体外成形能力;⑤银屑病组诱导的VEC对T细胞的具有迁移作用;⑥1例自分化患者高通量测定结果,共筛选了475个差异表达基因,其中298个基因表达呈增高趋势,177个基因呈降低趋势,其中,差异表达基因在2个term上有显著富集(P<0.05),分别为类前列腺素的代谢过程和前列腺素的代谢过程。【结论】银屑病患者BMMSCs生物学活性异常,且易于转分化为VEC。银屑病患者BMMSCs参与了银屑病的发病,其向VEC的异常分化可能是导致银屑病患者皮损真皮乳头层微血管异常增生的根源。

全文目录

缩略词表  5-6
中文摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9-10
第一章材料与方法  10-15
  1.1 标本来源  10
  1.2 主要试剂  10
  1.3 主要仪器设备  10-11
  1.4 实验方法  11-14
  1.5 数据处理  14-15
第二章实验结果  15-20
  2.1 BMMSCs 培养形态学观察及表面标志的鉴定  15
  2.2 BMMSCs 细胞诱导培养后形态学观察及表面标志的鉴定  15-20
讨论  20-23
结论  23-24
附图  24-28
参考文献  28-31
综述  31-38
  一、银屑病发病  31
  二、VEGF 及其受体  31-33
  三、VEGF 及其受体在银屑病中的作用  33-35
  参考文献  35-38
个人简介  38-39
致谢  39

银屑病患者骨髓间充质干细胞转分化为血管内皮细胞的初步研究

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