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唑来膦酸对成骨细胞增殖及IGF-1表达的影响
作 者: 郑振雨
导 师: 尹芸生
学 校: 山西医科大学
专 业: 骨外科学
关键词: 唑来膦酸 成骨细胞 IGF-1 骨质疏松
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 21次
引 用: 1次
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内容摘要
目的:观察唑来膦酸对体外大鼠成骨细胞增殖及IGF-1表达的影响,进而分析其对成骨质量的影响,为临床用药提供一定的理论依据。方法:1培养大鼠成骨细胞,并观察其形态和功能。2实验分组:实验组:含有不同浓度唑来膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)的培养基培养的细胞。对照组:使用普通培养基(唑来膦酸含量0mol/L)培养的细胞。3以大鼠成骨细胞为体外实验模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度唑来膦酸作用于原代培养的乳鼠成骨细胞7天后的增殖情况,测定OD值。使用ALP试剂盒检测碱性膦酸酶的活性。4不同浓度唑来膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L)干预原代培养的乳鼠成骨细胞7天后,通过ELISA方法检测IGF-1表达水平。5统计学方法:实验所得的数据均以均数±标准差标示,采用spss13.0统计软件对实验数据进行分析,各组总体上有无差别采用单因素方差分析,组间比较采用LSD法分析,p<0.05为有统计学意义。结果:1我们培养的大鼠成骨细胞多呈长梭形,碱性膦酸酶染色呈阳性,培养液中加入β-甘油膦酸钠和维生素C培养15天后茜素红染色阳性。2不同浓度的唑来膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L)作用于原代成骨细胞7天后,唑来膦酸浓度≥10-5mol/L时抑制成骨细胞增殖,与对照组比较,OD值显著减少(P<0.01)。唑来膦酸浓度为10-6-10-7mol/L时,与对照组比较,统计学差异均无显著性。(P>0.05),不影响细胞增殖。3唑来膦酸对成骨细胞生成ALP的抑制作用在≥10-6mol/L时出现,比对成骨细胞增殖的抑制作用更明显。4通过ELISA定量检测原代培养的成骨细胞IGF-1的表达。结果显示,唑来膦酸浓度在10-6-10-7mol/L时,不影响IGF-1的表达,即较低浓度的实验组与对照组比较统计学差异无显著性(P>0.05)。结论:1唑来膦酸在较低浓度范围内(10-6-10-7mol/L)不影响原代成骨细胞增殖。但是在浓度为10-6mol/L时,对ALP的抑制作用就已显现。2唑来膦酸在较低浓度范围内(10-6-10-7mol/L)不影响IGF-1的表达。3唑来膦酸对细胞增殖和IGF-1表达的影响密切相关。
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全文目录
中文摘要 5-6 Abstract 6-8 缩略词 8-9 前言 9-11 资料与方法 11-16 一 实验材料 11-13 1 主要试剂 11 2 主要仪器 11 3 试剂的配置 11-13 二 实验方法 13-16 1 成骨细胞培养和传代 13 2 成骨细胞鉴定 13-14 3 MTT 检测细胞增殖能力 14 4 成骨细胞ALP 活性检测 14-15 5 ELISA 检测唑来膦酸对成骨细胞IGF-1 表达的影响 15 6 统计方法 15-16 结果 16-23 一 成骨细胞观察及鉴定 16-18 二 唑来膦酸对成骨细胞增殖的影响 18 三 ALP 活性测定 18 四 唑来膦酸对成骨细胞IGF - 1表达的影响 18-23 讨论 23-26 一 成骨细胞的培养和鉴定 23 二 唑来膦酸对成骨细胞增殖和ALP 活性的影响 23-24 三 唑来膦酸对成骨细胞IGF-1 表达的影响 24-26 结论 26-27 参考文献 27-29 综述 29-36 参考文献 34-36 个人简介 36-37 个人概况 36 教育背景 36-37 致谢 37
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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