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ApoE4（1-272）过表达触发ERS损伤大鼠空间记忆能力

作　者: 张泉
导　师: 冯友梅
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 阿尔茨海默病 apoE4(1-272) 内质网应激 GRP78 4-PBA
分类号: R749.16
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的apoE4等位基因是公认的迟发型AD的危险因素之一,国内外研究提示其截断型片段apoE4(1-272)可能在AD发病过程中发挥重要作用,但机制不清。本研究探讨apoE4(1-272)是否可通过诱发内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)进而损伤大鼠空间参考记忆能力。方法将SD大鼠分为两组,假手术组和apoE4(1-272)转染组,48h后荧光显微镜检测海马区的荧光表达。24只SD雄性大鼠,随机分为四组:对照组,pEGFP转染组,apoE4(1-272)转染组和4-PBA处理组。4-PBA处理组先采用4-PBA(1g/kg/天)灌胃大鼠12周,然后采用脑立体定位注射将pEGFP-apoE4(1-272)基因转染至大鼠双侧海马区,继续每日4-PBA灌胃。各组大鼠术后48-72小时取双侧海马组织,一侧组织冰冻切片行荧光显微镜检测,一侧组织留做Western blot检测ApoE4(1-272)和ERS标志蛋白GRP78的表达。转染后一周Morris水迷宫检测大鼠的空间参考记忆。结果荧光显微镜及Western blot检测表明apoE4(1-272)质粒可通过定位注射到大鼠海马区并有效表达。Western blot结果显示ApoE4(1-272)过表达可诱导大鼠海马组织GRP78的表达量增加,4-PBA处理组可有效抑制该效应(P<0.01)。Morris水迷宫检测显示:ApoE4(1-272)过表达可导致大鼠空间记忆损伤,与对照组和pEGFP转染组相比,差异具显著性(P<0.01);4-PBA处理组可显著减轻ApoE4(1-272)过表达所致的大鼠空间记忆损伤,差异具显著性(P<0.01)。结论ApoE4(1-272)过表达可触发大鼠海马组织内质网应激进而导致大鼠空间记忆损伤。

全文目录

主要英文缩略语索引  5-6
中文摘要  6-7
ABSTRACT  7-8
前言  8-10
材料与方法  10-22
  1. 材料  10-14
  2. 实验方法  14-21
  3. 统计学处理  21-22
结果  22-26
  1. 荧光显微镜检测大鼠海马组织 ApoE4(1-272)的表达  22
  2. Western blot 检测大鼠海马组织 ApoE4(1-272)的表达  22-23
  3. ApoE4(1-272)过表达触发大鼠海马组织ERS  23-24
  4. 大鼠 Morris 水迷宫行为学测试  24-26
讨论  26-29
小结  29-30
参考文献  30-33
综述  33-43
  参考文献  40-43
致谢  43

ApoE4（1-272）过表达触发ERS损伤大鼠空间记忆能力

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