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控释rhGM-CSF胶原-壳聚糖多孔支架的促进血管化作用研究

作　者: 孙华凤
导　师: 韩春茂
学　校: 浙江大学
专　业: 外科学
关键词: rhGM-CSF 控制释放新生血管化皮肤组织工程
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 44次
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内容摘要

本文将细胞因子治疗与组织工程真皮支架相结合,构建了具细胞因子活性的支架。粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一种多功能的细胞因子,它能够调节造血细胞的增殖、分化,以及从骨髓中调动和招募造血干细胞和内皮干细胞,并且特定刺激使骨髓祖细胞分化成粒细胞和巨噬细胞。一旦皮肤受损,GM-CSF就被角质形成细胞分泌出来,调节表皮细胞,调动免疫系统,对创面愈合有积极作用,尤其是对于深Ⅱ度的烧伤创面和慢性溃疡创面。在本课题组前期的研究工作中,为了增强人工真皮替代物的血管化能力,以及使负载的细胞因子能够持续发挥作用,我们将rhGM-CSF负载于肝素化及1-乙基-3-(二甲基胺丙基)-碳化二甲胺/N-羟基丁二酰亚胺(EDC/NHS)交联的胶原-壳聚糖支架上。通过体外实验检测支架的基本性能,通过体内实验观察生物反应。体外rhGM-CSF控制释放的方式通过ELISA来检测,而体内实验部分我们使用了动物埋植模型。体内实验根据支架是否肝素化及是否负载rhGM-CSF分为四组,分别为：肝素化支架负载rhGM-CSF (H1E1/rhGM-CSF),非肝素化支架负载rhGM-CSF (H0E1/rhGM-CSF),肝素化支架未负载rhGM-CSF (H1E1)及未肝素化支架未负载rhGM-CSF (H0E1)。埋植术后观察28天,不同时间点取组织标本,做大体观察、组织病理学、免疫组化观察和western blot蛋白分析。实验结果显示：.肝素化支架较未肝素化支架有更缓慢的支架降解率,以使rhGM-CSF得以更好更稳定的缓释出来。体内实验观察显示,H1E1/rhGM-CSF在细胞黏附趋化、新生血管形成以及IL-6、VEGF和TGF-β1表达上都明显好于其他实验对照组。这说明了H1E1/rhGM-CSF能趋化炎症细胞向创面浸润,并促进血管化进程,这也暗示了该种复合真皮替代物通过持续传递rhGM-CSF至全层皮缺损创面的促血管化作用,能成为一种潜在的治疗手段应用于临床。

全文目录

致谢  4-5
摘要  5-7
Abstract  7-9
目次  9-10
前言  10-13
材料和方法  13-22
结果  22-38
讨论  38-41
结论  41-42
参考文献  42-49
综述  49-64
  参考文献  56-64
作者简介  64

控释rhGM-CSF胶原-壳聚糖多孔支架的促进血管化作用研究

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