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蛋内注射瘦素对肉鸡出雏后早期骨骼肌生长的影响

作　者: 刘朋飞
导　师: 赵茹茜
学　校: 南京农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 瘦素 肉鸡 蛋内注射 骨骼肌 生长
分类号: S831
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


本实验室以往的研究结果提示母鸡可通过调节瘦素在蛋内的沉积,程序化地影响后代出雏后的生长与代谢。本研究旨在探讨蛋内注射leptin对出雏后肉鸡早期骨骼肌生长的影响及其可能的作用途径。1蛋内注射瘦素对21日龄肉鸡体重及血清、肌肉指标的影响挑选蛋重相近的三黄肉鸡种蛋,随机分为三组：对照组(control group, CON)在蛋清内注射100μL溶剂(phosphate buffered saline, PBS), leptin处理组分别注射0.5μg/100μLPBS(低剂量组,low leptin group, LL)和5.0μg/100μLPBS(高剂量组,high leptin group, HL)的重组小鼠leptin,出雏后饲养至21日龄时称重并取腓肠肌和血清样品。用放射免疫方法测定血清leptin水平,用生化分析法测定血糖浓度和腓肠肌中肌糖原含量,用BCA法检测腓肠肌蛋白含量,用ATPase染色法分析腓肠肌肌纤维类型比例和肌纤维面积,并分析了各指标间的相关性。结果表明：高低剂量leptin均能显著增加21日龄肉鸡体重。高剂量leptin组平均日增重显著增加,而低剂量leptin组血糖浓度显著升高。Leptin的作用具有性别差异性。低剂量leptin能增加雄性肉鸡体重、平均日增重、腓肠肌重和腓肠肌蛋白含量,同时显著升高血糖浓度,对雌性肉鸡却没有显著性影响。高剂量leptin能增加雄性和雌性肉鸡的体重和平均日增重,不同的是雄性伴随肌纤维面积增大和血清leptin水平升高,而雌性仅表现腓肠肌重增加。腓肠肌肌糖原及肌纤维类型比例没有表现显著性变化。相关性分析显示,体重和平均日增重均与腓肠肌重正相关。体重、平均日增重和腓肠肌重与血糖浓度呈正相关,与腓肠肌蛋白含量呈负相关。雄性体重、平均日增重和腓肠肌重与血糖浓度呈正相关,而腓肠肌重与肌糖原含量呈负相关。雌性体重和平均日增重与腓肠肌肌糖原含量呈正相关。以上结果提示：蛋内注射leptin促进肉鸡出生后早期骨骼肌生长,且存在剂量和性别上的依赖性。2蛋内注射瘦素对21日龄肉鸡骨骼肌生长相关因子的影响为探讨蛋内注射leptin影响出雏后肉鸡骨骼肌生长的机制,我们用RT-PCR方法检测腓肠肌瘦素受体(leptin receptor, LEPR)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)-1及其受体IGF-1R、生长激素受体(growth hormone receptor, GHR)、甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor, TR)α及β、肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)和钙蛋白酶3 (calpain3, CAPN3)的mRNA表达,用Western-blot方法测定腓肠肌中LEPRb、IGF-1、MSTN前体(pre-MSTN)的蛋白含量,用荧光试剂盒检测CAPNs的活性。结果表明：低剂量leptin显著降低腓肠肌MSTN mRNA表达和CAPNs活性；高剂量leptin显著增加LEPR和IGF-1 mRNA表达。Leptin对上述生长相关因子表达的影响同样存在性别差异性。低剂量leptin能增加雄性MSTN和CAPN3 mRNA表达,降低CAPNs活性；对雌性却没有显著性影响。高剂量leptin能增加雄性IGF-1和CAPN3的mRNA表达以及pre-MSTN的蛋白表达；而对雌性则增加IGF-1R和CAPN3的：mRNA表达。Leptin处理对TRα及β、GHR mRNA及IGF-1蛋白等因子的表达没有显著影响。通过分析生长相关因子表达与生长表观指标间的相关性,发现IGF-1 mRNA与体重、平均日增重和腓肠肌重呈正相关,与腓肠肌蛋白含量呈负相关；IGF-1蛋白与血清leptin浓度和腓肠肌蛋白含量呈正相关；preMSTN蛋白与血清leptin浓度呈正相关；而LEPRb蛋白与血清leptin浓度呈负相关；TRαmRNA与腓肠肌蛋白含量呈负相关。雄性IGF-1R mRNA与腓肠肌蛋白含量呈正相关；LEPR mRNA与体重和平均日增重正相关。雌性IGF-1 mRNA与体重呈正相关；IGF-1蛋白和preMSTN蛋白与腓肠肌重、血清leptin呈正相关；IGF-1蛋白还与腓肠肌蛋白含量呈正相关。以上结果提示：leptin蛋内注射导致肉鸡出生后早期骨骼肌生长相关基因或蛋白表达的改变,且存在剂量和性别上的依赖性。IGF-1系统与骨骼肌生长的关系最为密切,但leptin程序化影响肉鸡骨骼肌生长的分子机制尚待进一步研究。

全文目录


摘要  6-8ABSTRACT  8-11缩略语  11-13引言  13-15第一篇 文献综述  15-33  第一章 骨骼肌生长的调控因子  15-27    1 生长激素  15-17    2 胰岛素样生长因子1  17-20    3 肌肉生长抑制素  20-24    4 钙蛋白酶  24-27  第二章 瘦素对骨骼肌生长的作用  27-33    1 瘦素概述  27-28    2 瘦素调节成肌细胞的增殖及分化  28-29    3 瘦素调节肌纤维的肥大  29-30    4 瘦素与骨骼肌糖代谢的关系  30-33第二篇 试验研究  33-59  第三章 蛋内注射瘦素对21日龄肉鸡体重及血清、骨骼肌指标的影响  33-45    1 材料与方法  33-36    2 结果与分析  36-43    3 讨论  43-45  第四章 蛋内注射瘦素对21日龄肉鸡骨骼肌生长相关因子的影响  45-59    1 材料与方法  45-50    2 结果与分析  50-55    3 讨论  55-59结论  59-61参考文献  61-79致谢  79

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家禽 > 鸡
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